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沃特世UPLC柱配套消耗品及使用維護(hù)

來源:檢碩科學(xué)器材(上海)有限公司   2020年01月09日 10:54  

如何延長UPLC柱壽命

關(guān)于流動(dòng)相

  • 選擇優(yōu)質(zhì)的色譜級(jí)流動(dòng)相溶劑;
  • 確保使用超純水,純化水系統(tǒng)應(yīng)始終處于良好的工作狀態(tài);
  • 通道中避免使用100%水相,如含有5-10%有機(jī)相就可顯著抑菌; 如果必須使用100%水相,則每24-48小時(shí)必須新鮮配制、* 更換(含溶劑瓶)
  • 對(duì)流動(dòng)相水溶液部分使用0.2 µm過濾膜過濾(推薦使用:沃特世P/N:186003524 0.2 µm 47 mm GHP)。

關(guān)于樣品制備

  • 樣品溶液中的微粒會(huì)堵塞系統(tǒng)管路或色譜柱,可使用高速離心

/或用0.2 µm過濾膜過濾樣品,確保濾膜與樣品溶液兼容(推薦使用:沃特世 P/N: WAT097962,針式過濾膜GHP;或垂詢我們)

  • 確保樣品與流動(dòng)相體系兼容,進(jìn)樣后不會(huì)發(fā)生沉淀;
  • 較臟的樣品,容易造成色譜柱污染,使用適合的固相萃取小柱對(duì)樣品進(jìn)行凈化處理。

清洗與再生

親水作用色譜柱操作建議

(CORTECS HILIC、BEH HILIC、BEH Amide)

親水作用色譜柱的使用方法與反相色譜柱有很大的不同,需要加以

注意。(關(guān)于HILIC,請(qǐng)?jiān)L問waters.con/hilic,并參考《HILIC   綜合指南》,715002531ZH)。

樣品制備

  • 應(yīng)盡可能使用較高比例的有機(jī)溶劑(95%乙腈),以避免溶劑效應(yīng)。如果存在樣品溶解問題,應(yīng)至少使用50/50乙腈/水,并減少進(jìn)樣體積。

柱平衡

  • 初次使用時(shí),先用50倍柱體積的50/50乙腈/(CORTECS HILIC, BEH HILIC,如果流動(dòng)相條件含有緩沖鹽則需添加10 mM流動(dòng)相緩沖鹽)60/40乙腈/(BEH Amide)對(duì)柱進(jìn)行老化;
  • 開始進(jìn)樣前,用20倍柱體積的起始流動(dòng)相條件進(jìn)行平衡;
  • 如果使用梯度條件,每次梯度之間,用8-10倍柱體積的起始流動(dòng)相條件再次平衡。
  • 沒有充分老化平衡的色譜柱,將會(huì)出現(xiàn)柱效較低、以及保留時(shí)間漂移的問題。

柱清洗再生

  • 對(duì)于ACQUITY UPLC BEH HILICCORTECS HILIC色譜柱,用

50/50乙腈/水清洗以去除極性污染物。如果不能解決問題,用5/95

的乙腈/水沖洗;

  • 對(duì)于ACQUITY UPLC Amide色譜柱,可采用10分鐘的梯度洗脫從100%有機(jī)相到100%水相。值得注意的是當(dāng)水相比例升高,壓力將迅速增加,當(dāng)水相比例超過60%時(shí)需降低流速。如果有必要可重復(fù)清洗。

柱保存

  • 先將緩沖鹽從色譜柱內(nèi)沖洗干凈,然后將色譜柱保存在95/5乙腈/(BEH HILIC,CORTECS HILIC)100%乙腈(BEH Amide)中。

 

過濾膜

沃特世建議您使用0.2 µm的過濾膜對(duì)緩沖溶液和樣品進(jìn)行過濾, 以避免顆粒物質(zhì)堵塞色譜柱和儀器部件。

產(chǎn)品描述

部件編號(hào)

0.2 µm, 47 mm GHP溶劑過濾膜(100/包)

186003524

0.2 µm, GHP針式過濾器(100/包)

WAT097962

0.2 µm, GHP針式過濾器(300/包)

WAT097963

0.2 µm, GHP針式過濾器(1000/包)*

186005595

0.2 µm, PVDF針式過濾器(100/包)**

WAT200804

UPLC柱配件

1.0 mm UPLC 柱入口/出口過濾篩板, 0.2 µm, 3 個(gè)/包700003775
3.0 mm UPLC柱入口/出口過濾篩板,0.2 µm,3 個(gè)/包700004790
2.1 mm UPLC 柱入口端螺母,1 個(gè)/包 700003779
2.1 mm UPLC 柱出口端螺母,1 個(gè)/包 700003780
1.0 mm UPLC 柱入口端螺母,1 個(gè)/包 700003777
1.0 mm UPLC 柱出口端螺母,1 個(gè)/包 700003778
3.0 mm UPLC柱出口端螺母,1個(gè)/包 700004791

UPLC柱的連接

ACQUITY UPLC系統(tǒng)使用專門設(shè)計(jì)的可耐受高壓并且有

小柱外體積的管路和接頭。*的色譜柱進(jìn)口管路(訂貨號(hào)430001084)是隨ACQUITY     UPLC色譜系統(tǒng)配的,進(jìn)樣閥末端的管路清晰地用藍(lán)色標(biāo)記標(biāo)示出來,將這根管路的另一端插入UPLC色譜柱的入口端并用5/16英寸的扳手?jǐn)Q緊。關(guān)于ACQUITY   UPLC色譜柱正確的出口管路,請(qǐng)參考ACQUITY UPLC系統(tǒng)操作手冊(cè)的相關(guān)檢測(cè)器部分(訂貨號(hào)71500082502)。

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