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氨基酸的性質

來源:廣州佳途科技股份有限公司   2017年12月30日 11:06  
  (一)物理性質
 
  α-氨基酸都是白色晶體,每種氨基酸都有特殊的結晶形狀,可以用來鑒別各種氨基酸。除胱氨酸和酪氨酸外,都能溶于水中。脯氨酸和羥脯氨酸還能溶于乙醇或乙MI中。
 
  除甘氨酸外,α-氨基酸都有旋光性,α-碳原子具有手性。蘇氨酸和異亮氨酸有兩個手性碳原子。從蛋白質水解得到的氨基酸都是L-型。但在生物體內特別是細菌中,D-氨基酸也存在,如細菌的細胞壁和某些抗菌素中都含有D-氨基酸。
 
  三個帶苯環(huán)的氨基酸有紫外吸收,F(xiàn):257nm,ε=200; Y:275nm,ε=1400;
 
  W:280nm,ε=5600。通常蛋白質的紫外吸收主要是后兩個氨基酸決定的,一般在280nm。
 
  氨基酸分子中既含有氨基又含有羧基,在水溶液中以偶極離子的形式存在。所以氨基酸晶體是離子晶體,熔點在200℃以上。氨基酸是兩性電解質,各個解離基的表觀解離常數(shù)按其酸性強度遞降的順序,分別以K1’、K2’來表示。當氨基酸分子所帶的凈電荷為零時的pH稱為氨基酸的等電點(pI)。等電點的值是它在等電點前后的兩個pK’值的算術平均值。
 
  氨基酸*質子化時可看作多元弱酸,各解離基團的表觀解離常數(shù)按酸性減弱的順序,以pK1’、pK2’、pK3’表示。氨基酸可作為緩沖溶液,在pK’處的緩沖能力zui強,pI處的緩沖能力zui弱。
 
  (二)化學性質
 
  1.氨基的反應
 
  (1)?;?br /> 
  氨基可與?;噭?,如酰氯或酸酐在堿性溶液中反應,生成酰胺。該反應在多肽合成中可用于保護氨基。
 
  (2)與亞硝酸作用
 
  氨基酸在室溫下與亞硝酸反應,脫氨,生成羥基羧酸和氮氣。因為伯胺都有這個反應,所以賴氨酸的側鏈氨基也能反應,但速度較慢。常用于蛋白質的化學修飾、水解程度測定及氨基酸的定量。
 
  (3)與醛反應
 
  氨基酸的α-氨基能與醛類物質反應,生成西佛堿-C=N-。西佛堿是氨基酸作為底物的某些酶促反應的中間物。賴氨酸的側鏈氨基也能反應。氨基還可以與甲醛反應,生成羥甲基化合物。由于氨基酸在溶液中以偶極離子形式存在,所以不能用酸堿滴定測定含量。與甲醛反應后,氨基酸不再是偶極離子,其滴定終點可用一般的酸堿指示劑指示,因而可以滴定,這叫甲醛滴定法,可用于測定氨基酸。
 
  (4)與異硫氰酸苯酯(PITC)反應
 
  α-氨基與PITC在弱堿性條件下形成相應的苯氨基硫甲酰衍生物(PTC-AA),后者在硝基甲烷中與酸作用發(fā)生環(huán)化,生成相應的苯乙內酰硫脲衍生物(PTH-AA)。這些衍生物是無色的,可用層析法加以分離鑒定。這個反應首先為Edman用來鑒定蛋白質的N-末端氨基酸,在蛋白質的氨基酸順序分析方面占有重要地位。
 
  (5)磺?;?br /> 
  氨基酸與5-(二甲胺基)萘-1-磺酰氯(DNS-Cl)反應,生成DNS-氨基酸。產物在酸性條件下(6NHCl)100℃也不破壞,因此可用于氨基酸末端分析。DNS-氨基酸有強熒光,激發(fā)波長在360nm左右,比較靈敏,可用于微量分析。
 
  (6)與DNFB反應
 
  氨基酸與2,4-二硝基氟苯(DNFB)在弱堿性溶液中作用生成二硝基苯基氨基酸(DNP氨基酸)。這一反應是定量轉變的,產物黃色,可經(jīng)受酸性100℃高溫。該反應曾被英國的Sanger用來測定胰島素的氨基酸順序,也叫桑格爾試劑,現(xiàn)在應用于蛋白質N-末端測定。
 
  (7)轉氨反應
 
  在轉氨酶的催化下,氨基酸可脫去氨基,變成相應的酮酸。
 
  2.羧基的反應
 
  羧基可與堿作用生成鹽,其中重金屬鹽不溶于水。羧基可與醇生成酯,此反應常用于多肽合成中的羧基保護。某些酯有活化作用,可增加羧基活性,如對硝基苯酯。將氨基保護以后,可與二氯亞砜或五氯化磷作用生成酰氯,在多肽合成中用于活化羧基。在脫羧酶的催化下,可脫去羧基,形成伯胺。
 
  3茚三酮反應
 
  氨基酸與茚三酮在微酸性溶液中加熱,zui后生成藍色物質。而脯氨酸生成黃色化合物。根據(jù)這個反應可通過二氧化碳測定氨基酸含量。
 
  4.側鏈的反應
 
  絲氨酸、蘇氨酸含羥基,能形成酯或苷。
 
  半胱氨酸側鏈巰基反應性高:
 
  (1)二硫鍵(disulfide bond)
 
  半胱氨酸在堿性溶液中容易被氧化形成二硫鍵,生成胱氨酸。胱氨酸中的二硫鍵在形成蛋白質的構象上起很大的作用。氧化劑和還原劑都可以打開二硫鍵。在研究蛋白質結構時,氧化劑過甲酸可以定量地拆開二硫鍵,生成相應的磺酸。還原劑如巰基乙醇、巰基乙酸也能拆開二硫鍵,生成相應的巰基化合物。由于半胱氨酸中的巰基很不穩(wěn)定,極易氧化,因此利用還原劑拆開二硫鍵時,往往進一步用碘乙酰胺、氯化芐、N-乙基丁烯二亞酰胺和對氯汞苯甲酸等試劑與巰基作用,把它保護起來,防止它重新氧化。
 
  (2)烷化
 
  半胱氨酸可與烷基試劑,如碘乙酸、碘乙酰胺等發(fā)生烷化反應。
 
  半胱氨酸與丫丙啶反應,生成帶正電的側鏈,稱為S-氨乙基半胱氨酸(AECys)。
 
  (3)與重金屬反應
 
  極微量的某些重金屬離子,如Ag+、Hg2+,就能與巰基反應,生成硫醇鹽,導致含巰基的酶失活。
 
  5. 以下反應常用于氨基酸的檢驗:
 
  l酪氨酸、組氨酸能與重氮化合物反應(Pauly反應),可用于定性、定量測定。組氨酸生成棕紅色的化合物,酪氨酸為桔黃色。
 
  l精氨酸在氫氧化鈉中與1-萘酚和次溴酸鈉反應,生成深紅色,稱為坂口反應。用于胍基的鑒定。
 
  l酪氨酸與硝酸、亞硝酸、硝酸汞和亞硝酸汞反應,生成白色沉淀,加熱后變紅,稱為米倫反應,是鑒定酚基的特性反應。
 
  l色氨酸中加入乙醛酸后再緩慢加入濃硫酸,在界面會出現(xiàn)紫色環(huán),用于鑒定吲哚基。
 
  在蛋白質中,有些側鏈基團被包裹在蛋白質內部,因而反應很慢甚至不反應。

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