整體柱主要分為有機(jī)聚合物整體柱和無(wú)機(jī)硅膠整體柱。有機(jī)聚合物整體柱由單體、引發(fā)劑、制孔劑等混合物通過原位聚合制備而成。其在制備時(shí)選材范圍廣,因而具有不同的選擇性,適用pH的范圍寬。高聚物的發(fā)展由zui初的親水丙烯酸酯到異丁酸酯再到更加堅(jiān)硬的聚苯乙烯-二乙烯基苯。而且目前使用的高聚物主要是聚丙烯酰胺,聚甲基丙烯酸酯以及衍生的聚苯乙烯。無(wú)機(jī)硅膠整體柱多采用溶膠-凝膠法制備,此法制備的整體柱具有兩種孔結(jié)構(gòu),即微米級(jí)的通孔(throughpore or macropore)和納米級(jí)的中孔(meso- pore)。通孔和中孔結(jié)構(gòu)的存在既保證了流動(dòng)相的流通又便于樣品分子的進(jìn)入,使整體柱具有高的滲透率(孔隙度大于80%),這樣即使采用較高流速,也不會(huì)出現(xiàn)太高的柱壓,從而可縮短分析時(shí)間。此外,多個(gè)整體柱可以串聯(lián)使用,比傳統(tǒng)的采用填料的技術(shù)更易獲得高的柱效。
蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)是生命科學(xué)中一類重要的生物大分子(biopolymer, biomacromelecule)。按照色譜動(dòng)力學(xué)理論,當(dāng)粒徑與孔徑的比值大于0.2時(shí),溶質(zhì)分子的擴(kuò)散便受到限制,不能*接近固定相表面。整體柱由于其多孔性以及可控制孔徑大小的特點(diǎn),在生物大分子分析上顯出極大的優(yōu)勢(shì)。筆者對(duì)整體柱應(yīng)用于液相色譜和毛細(xì)管電色譜模式分析生物大分子的現(xiàn)狀進(jìn)行了綜述。
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