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賽默飛的Countess 3 FL自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀是一款先進(jìn)的設(shè)備,配備了可更換的LED光立方,支持多種熒光染料的檢測(cè)。在使用熒光染料標(biāo)記細(xì)胞后,儀器通過(guò)熒光散點(diǎn)圖(scatter plot)展示細(xì)胞群體的分布情況。這些散點(diǎn)圖基于細(xì)胞的熒光強(qiáng)度,幫助研究人員區(qū)分不同的細(xì)胞群體。
熒光散點(diǎn)圖的功能:
細(xì)胞群體區(qū)分: 通過(guò)熒光散點(diǎn)圖,研究人員可以根據(jù)熒光強(qiáng)度區(qū)分不同的細(xì)胞群體。例如,使用ReadyCount Green/Red細(xì)胞活性染料時(shí),活細(xì)胞和死細(xì)胞在散點(diǎn)圖上呈現(xiàn)不同的熒光強(qiáng)度分布。
Thermo Fisher數(shù)據(jù)分析: 散點(diǎn)圖提供了細(xì)胞群體的分布信息,研究人員可以通過(guò)設(shè)定門控區(qū)域(gating)來(lái)選擇特定的細(xì)胞群體,進(jìn)行進(jìn)一步的分析。
Thermo Fisher Scientific結(jié)果保存與導(dǎo)出: Countess 3 FL自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀支持將散點(diǎn)圖數(shù)據(jù)保存為FCS文件格式,方便在流式細(xì)胞儀分析軟件中進(jìn)行進(jìn)一步分析。
Thermo Fisher
使用熒光散點(diǎn)圖的步驟:
樣本準(zhǔn)備: 將細(xì)胞與熒光染料混合,確保染料充分與細(xì)胞結(jié)合。
加載樣本: 將染色后的細(xì)胞樣本加載到Countess 3 FL計(jì)數(shù)板中。
選擇熒光通道: 根據(jù)所使用的熒光染料,選擇相應(yīng)的LED光立方,以激發(fā)并檢測(cè)特定的熒光信號(hào)。
觀察散點(diǎn)圖: 儀器會(huì)自動(dòng)生成熒光散點(diǎn)圖,研究人員可以根據(jù)需要調(diào)整門控參數(shù),選擇特定的細(xì)胞群體。
數(shù)據(jù)保存與分析: 將結(jié)果保存為所需的文件格式,方便后續(xù)分析。
通過(guò)以上步驟,Countess 3 FL自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀利用熒光散點(diǎn)圖提供了直觀的細(xì)胞群體分布信息,幫助研究人員進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)、活性分析等多種應(yīng)用。