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4500液質(zhì)聯(lián)用儀的操作規(guī)程

閱讀:95      發(fā)布時間:2025-3-12
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4500液質(zhì)聯(lián)用儀的操作規(guī)程主要包括開關(guān)機(jī)、儀器校準(zhǔn)與調(diào)諧以及化合物參數(shù)優(yōu)化等步驟。以下是對這些步驟的詳細(xì)闡述:  
一、開關(guān)機(jī)  
開機(jī)步驟  
打開UPS電源,確保儀器有足夠的電力供應(yīng)。  
打開氮氣發(fā)生器(氣瓶),并確認(rèn)Curtaingas的輸入壓力為0.4MPa,gas1/2為0.7MPa,exhuast為0.4MPa。這些氣體的壓力和流量對于儀器的穩(wěn)定運行至關(guān)重要。  
打開機(jī)械泵電源開關(guān)。對于5500系列,直接打開質(zhì)譜主機(jī)電源,儀器會自動啟動機(jī)械泵。  
等待機(jī)械泵工作至少30分鐘,以確保儀器內(nèi)部達(dá)到所需的真空度。  
打開質(zhì)譜主機(jī)電源開關(guān)。  
讓儀器過夜抽真空,以確保質(zhì)譜儀在分析過程中能夠保持高性能。  
關(guān)機(jī)步驟  
停止輸液:關(guān)停針泵或液相泵,或斷開輸液管線。確保沒有任何液體再泵入質(zhì)譜,以保護(hù)儀器不受污染。  
使儀器待機(jī),并滅活配置。這有助于延長儀器的使用壽命。  
關(guān)閉質(zhì)譜儀主機(jī)電源開關(guān)。對于5500系列,只需按下電源開關(guān)旁的VENT按鍵排放真空。  
機(jī)械泵繼續(xù)工作至少30分鐘,以幫助儀器內(nèi)部逐漸恢復(fù)到大氣壓。  
關(guān)閉機(jī)械泵上的電源開關(guān)。對于5500系列,儀器會自動關(guān)停機(jī)械泵,待機(jī)械泵停止后即可關(guān)閉主機(jī)上的電源開關(guān)。  
關(guān)閉氣體發(fā)生器或氣瓶,以節(jié)省能源并保護(hù)設(shè)備。  
二、儀器校準(zhǔn)與調(diào)諧  
儀器校準(zhǔn)與調(diào)諧是確保4500液質(zhì)聯(lián)用儀準(zhǔn)確性的關(guān)鍵步驟。這通常包括在Analyst軟件中進(jìn)行手動質(zhì)量校準(zhǔn)。一般儀器在開關(guān)機(jī)后才需要做調(diào)諧或每個季度例行調(diào)諧。具體步驟如下:  
打開analyst軟件,雙擊HardwareConfigure,在硬件配置菜單下單擊massSpecOnly(只連質(zhì)譜機(jī)),然后單擊Activeprofile激活儀器。當(dāng)硬件配置表中massSpecOnly出現(xiàn)綠勾后,表示質(zhì)譜儀主機(jī)與計算機(jī)通訊正常。  
雙擊左邊工具菜單NavigationBar中的ManualTuning,打開一個空白質(zhì)譜參數(shù)設(shè)置及運行窗口,進(jìn)入手動調(diào)諧模式。  
在project工具條中選擇以installation開頭的項目文件夾,然后點擊Fileopen,選擇AcquisitionMethod打開四極桿校準(zhǔn)方法文件列表。根據(jù)要校準(zhǔn)的目標(biāo)(如Q1正離子、Q1負(fù)離子等)選擇相應(yīng)的方法打開。  
用針泵進(jìn)質(zhì)量校準(zhǔn)溶液,調(diào)離子源噴霧針位置到5mm處。對于不同儀器和測定極性,要使用不同的PPG校準(zhǔn)溶液,并保持針泵流速為10ul/min。  
采集PPG標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)譜數(shù)據(jù)。在質(zhì)譜參數(shù)設(shè)置及運行窗口中點擊Start開始采集數(shù)據(jù)。采集完成后,進(jìn)行分辨率調(diào)整和質(zhì)量校準(zhǔn)。  
分辨率調(diào)整的目標(biāo)是讓每個數(shù)據(jù)點都落在兩條虛線之間。如果某些PPG峰寬超出分辨率范圍,應(yīng)進(jìn)行手動調(diào)整。調(diào)整Offset值會影響分辨率。以中心實線為基準(zhǔn),半峰寬偏大的調(diào)大Offset值(考慮正負(fù)),半峰寬偏小的調(diào)小Offset值(考慮正負(fù))。調(diào)整幅度為每次0.003,并按下Apply鈕確認(rèn)修改。然后重新采集數(shù)據(jù)并重復(fù)此過程直到所有點的分辨率合乎范圍。  
質(zhì)量校準(zhǔn)是在Offset值設(shè)定合適且所有PPG離子的分辨率在兩條虛線范圍內(nèi)后進(jìn)行的。再采集一次PPG數(shù)據(jù),并在MassCalibrationReport中按Updatemasscalibration按鈕進(jìn)行更新。軟件系統(tǒng)會提示是否用新的校準(zhǔn)曲線替換已存在的校準(zhǔn)曲線,此時應(yīng)回答“YES”以完成校準(zhǔn)。  
三、化合物參數(shù)優(yōu)化  
化合物參數(shù)優(yōu)化是提高4500液質(zhì)聯(lián)用儀分析性能的重要步驟。這通常包括找母離子和找子離子兩個過程。具體步驟如下:  
找母離子  
在ManualTuning窗口下選擇Q1MS全掃描模式,并設(shè)置相關(guān)參數(shù)如采集時間、分子量范圍等。  
運行針泵(10ul/min)并采集數(shù)據(jù)。待左側(cè)窗口TIC序號穩(wěn)定后再繼續(xù)采集一段時間(如1分鐘),然后在TIC圖上選擇最后一段時間內(nèi)的譜圖進(jìn)行分析。記錄目標(biāo)化合物峰的中心對應(yīng)的橫坐標(biāo)分子量作為該化合物的準(zhǔn)確分子量。  
找子離子  
在當(dāng)前方法文件的ScanType下選擇ProductIonScan(MS2)模式,并去除Center/with選項。在Productof欄填入上一步找到的母離子的準(zhǔn)確分子量,并設(shè)置相關(guān)參數(shù)如起始和停止質(zhì)量范圍、采集時間等。  
點擊Start采集數(shù)據(jù),并手動調(diào)節(jié)CE值(每次增加一定量,如5)以觀察母離子碎片化的程度。當(dāng)母離子的信號約只有強(qiáng)碎片離子信號三分之一左右時,保持繼續(xù)采集一段時間(如1分鐘),然后在左側(cè)TIC圖上選擇最后一段時間內(nèi)的譜圖進(jìn)行分析。記錄兩個強(qiáng)的碎片離子分子量作為該化合物的子離子。  
通過以上步驟的操作規(guī)程,可以確保4500液質(zhì)聯(lián)用儀在分析過程中保持高性能和準(zhǔn)確性。同時,定期維護(hù)和保養(yǎng)也是保持儀器良好狀態(tài)的關(guān)鍵。

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