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皖儀科技液相色譜檢測食品中的6種著色劑

摘要：本文參考GB 5009.35-2016標準建立了一種高效液相色譜法測定食品中6種著色劑（檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、日落黃、亮藍和赤蘚紅）含量的分析方法。結(jié)果表明1.00-50.0μg/mL濃度范圍內(nèi)的線性決定系數(shù)R平方值均大于0.999，具有良好線性，符合實驗要求。6種著色劑峰分離度均大于3，分離度良好。6種著色劑的保留時間重復性小于0.1%，峰面積重復性小于0.2%，測試重復性良好。該方法準確可靠、靈敏度高，滿足測試需求。

前言

著色劑又稱食品色素，是以食品著色為主要目的，使食品賦予色澤和改善食品色澤的物質(zhì)。長期食用著色劑超標的產(chǎn)品，將危害消費者的身體健康。食品中人工合成著色劑用聚酰胺吸附法或液-液分配法提取，制成水溶液，注入高效液相色譜儀，經(jīng)反相色譜分離，根據(jù)保留時間定性和與峰面積比較進行定量。

1 實驗方法

1.1 儀器配置

          表1 高效液相色譜系統(tǒng)配置清單

1.2 測試條件

色譜柱：C18 5μm, 4.6×250mm；

柱溫：35℃；

波長：254nm；

流速：1.0 mL/min；

進樣體積：10μL；

流動相：A/B=0.02mol/L乙酸銨溶液/甲醇；

洗脫方式：梯度洗脫。

              表2 梯度條件

1.3 設(shè)備及試劑、耗材

試劑：檸檬黃(CAS:1934-21-0)；

日落黃(CAS:2783-94-0)；

亮藍(CAS:3844-45-9)；

胭脂紅(CAS:2611-82-7)；

莧菜紅(CAS:915-67-3)；

赤蘚紅(CAS:16423-68-0)；

甲醇：色譜純；

乙酸銨：分析純；

設(shè)備：超聲脫氣裝置；

耗材：濾膜：水相針式濾器（聚醚砜）0.45μm；

一次性無菌加液器：2mL 0.6*25mm1.

1.4 標樣制備

1.4.1 著色劑混標配制

分別準確移取胭脂紅，亮藍，日落黃，莧菜紅，赤蘚紅標準溶液各1.0mL，檸檬黃標準溶液0.5mL于10mL容量瓶中，用水定容至刻度，混勻，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾。配制成質(zhì)量濃度分別為胭脂紅、亮藍、日落黃、莧菜紅標準溶液濃度為50.0μg/mL，25.0μg/mL的檸檬黃標準溶液，10.0μg/mL的赤蘚紅標準溶液。置于4℃冰箱中冷藏保存。

1.4.2 六種著色劑混標系列校準溶液

配制胭脂紅10μg/mL,亮藍50μg/mL，日落黃25μg/mL，莧菜紅25μg/mL，赤蘚紅25μg/mL，檸檬黃5μg/mL不同濃度的混標溶液，加水定容至1ml。逐級稀釋，配制成不同濃度梯度的6種著色劑混標使用液。

1.4.3 六種著色劑單標標準溶液配制

分別準確移取胭脂紅，亮藍，日落黃，莧菜紅，赤蘚紅標準溶液各1.0mL，檸檬黃標準溶液0.5mL于6個10mL容量瓶中，分別用水定容至刻度，混勻，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾。配制成質(zhì)量濃度分別為胭脂紅、亮藍、日落黃、莧菜紅標準溶液濃度為50.0μg/mL，25.0μg/mL的檸檬黃標準溶液，10.0μg/mL的赤蘚紅標準溶液。置于4℃冰箱中冷藏保存。

2 結(jié)果與討論

2.1 單標定性及系統(tǒng)適用性

取1.4.3中6種著色劑單標標準溶液和1.4.1中6種著色劑混標溶液，按照1.2的測試條件進樣分析，通過單標定性確定混標中不同著色劑出峰時間，譜圖如圖1所示。通過混標譜圖分析得到六個峰的分離度均大于3，分離度良好。

              圖1 單標定性分析譜圖

2.2 標準曲線取

1.4.2中6種著色劑混標系列校準溶液，按照1.2的測試條件進樣分析，以濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，采用外標法建立工作曲線。6種著色劑標曲結(jié)果分別如圖2-7所示。不同濃度曲線重疊譜圖如圖8所示。6種著色劑曲線的線性決定系數(shù)R平方值均大于0.999，具有良好線性關(guān)系，符合實驗要求。

         圖2 檸檬黃系列校準曲線線性圖

          圖3 莧菜紅系列校準曲線線性圖

          圖4 胭脂紅系列校準曲線線性圖

          圖5 日落黃系列校準曲線線性圖

          圖6 亮藍系列校準曲線線性圖

         圖7 赤蘚紅系列校準曲線線性圖

         圖8 六種著色劑校準系列溶液重疊譜圖

2.3 重復性

取1.4.1中6種著色劑混標溶液重復進樣6次，按照1.2的測試條件分別連續(xù)進樣測定6次，重復性色譜圖如圖9所示，根據(jù)測試結(jié)果可得，6種著色劑的保留時間重復性小于0.1%，峰面積重復性小于0.2%，測試重復性良好說明皖儀科技LC3300系列高效液相色譜儀具有良好的精密度。

         圖9 六種著色劑混標重復性疊加譜圖

3 結(jié)論

本文使用皖儀科技LC3300系列高效液相色譜儀對食品中的著色劑進行了檢測，結(jié)果表明1.00-50.0μg/mL濃度范圍內(nèi)的線性決定系數(shù)R平方值均大于0.999，具有良好線性，符合實驗要求。6種著色劑峰分離度均大于3，分離度良好。6種著色劑的保留時間重復性小于0.1%，峰面積重復性小于0.2%，測試重復性良好。該方法準確可靠、靈敏度高，滿足測試需求。