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TC含量檢測(cè)試劑盒的使用
總膽固醇(TC)含量檢測(cè)試劑盒的原理：
TC 包括游離膽固醇和膽固醇酯，TC 是指組織中所有脂蛋白所含膽固醇之總和。利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇 (FC) 和游離脂肪酸 (FFA)，從而把膽固醇酯 轉(zhuǎn)化為 FC；進(jìn)一步利用膽固醇氧化酶催化 FC 氧化，生成△4-膽甾烯酮和 H2O2；最后利用過(guò)氧化物酶催化 H2O2 氧化 4-氨基安替比林和酚，生成紅色醌類(lèi)化合物；在 500nm 有特征吸收峰，其顏色深淺與 TC 含量成正比。
總膽固醇(TC)含量檢測(cè)試劑盒操作步驟:
一、TC 的提取:
1、組織中TC 的提取:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:510的比例(建議稱
取約0.1g 組織，加入1mL 試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿，8000g 4℃離心10min，取上清，即
TC待測(cè)液。
2、 細(xì)胞、細(xì)菌中TC 的提取:先收集400-500萬(wàn)細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，加1mL
試劑一，超聲波破碎1min(強(qiáng)度20%，超聲2s，停1s)，8000g4℃離心10min，取上
清，即TC 待測(cè)液。
3、 血清(漿)等樣品:直接測(cè)定。
二、測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到500nm，蒸餾水調(diào)零。
2. TC 工作液置于37℃水浴30min。
3.標(biāo)準(zhǔn)管:在1mL玻璃比色皿中依次加入50μLTC 標(biāo)準(zhǔn)品和150uLTC 工作液，混勻。
靜置24h 后于500nm處比色，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
4.測(cè)定管:在1mL 玻璃比色皿中依次加入50μLTC 待測(cè)液和150μLTC 工作液，混勻，
靜置24h后于500nm 處比色，記為A測(cè)定管。
注意:標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。