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快速制備液相色譜主要由以下五個系統(tǒng)組成

閱讀:2571        發(fā)布時間:2021-1-23
  快速制備液相色譜主要有進樣系統(tǒng)、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)和檢測系統(tǒng),下面將分別敘述其各自的組成與特點。
  
  1、進樣系統(tǒng):一般采用隔膜注射進樣器或高壓進樣間完成進樣操作,進樣量是恒定的。這對提高分析樣品的重復性是有益的;
  2、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng):該系統(tǒng)可對測試數(shù)據(jù)進行采集、貯存、顯示、打印和處理等操作,使樣品的分離、制備或鑒定工作能正確開展;
  3、分離系統(tǒng):該系統(tǒng)包括色譜柱、連接管和恒溫器等。色譜柱一般長度為10~50cm,內(nèi)徑為2~5mm,由"不銹鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料制成,住內(nèi)裝有直徑為5~10μm粒度的固定相。固定相中的基質是由機械強度高的樹脂或硅膠構成,它們都有惰性、多孔性和比表面積大的特點,加之其表面經(jīng)過機械涂漬,或者用化學法偶聯(lián)各種基因或配體的有機化合物。因此,這類固定相對結構不同的物質有良好的選擇性;
  4、輸液系統(tǒng):該系統(tǒng)包括高壓泵、流動相貯存器和梯度儀三部分。高壓泵的一般壓強為l.47~4.4X107Pa,流速可調且穩(wěn)定,當高壓流動相通過層析柱時,可降低樣品在柱中的擴散效應,可加快其在柱中的移動速度,這對提高分辨率、回收樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。流動相貯存錯和梯度儀,可使流動相隨固定相和樣品的性質而改變,包括改變洗脫液的極性、離子強度、PH值,或改用競爭性抑制劑或變性劑等。這就可使各種物質都能獲得有效分離;
  5、檢測系統(tǒng):快速制備液相色譜常用的檢測器有紫外檢測器、示差折光檢測器和熒光檢測器三種。
  a、紫外檢測器該檢測器適用于對紫外光有吸收性能樣品的檢測。其特點:使用面廣;靈敏度高;線性范圍寬;對溫度和流速變化不敏感;可檢測梯度溶液洗脫的樣品;
  b、示差折光檢測器凡具有與流動相折光率不同的樣品組分,均可使用示差折光檢測器檢測。目前,糖類化合物的檢測大多使用此檢測系統(tǒng)。這一系統(tǒng)通用性強、操作簡單,但靈敏度低,流動相的變化會引起折光率的變化,因此,它既不適用于痕量分析,也不適用于梯度洗脫樣品的檢測;
  c、熒光檢測器凡具有熒光的物質,在一定條件下,其發(fā)射光的熒光強度與物質的濃度成正比。因此,這一檢測器只適用于具有熒光的有機化合物的測定,其靈敏度很高,痕量分析和梯度洗脫作品的檢測均可采用。

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