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MKN-7人胃癌細(xì)胞(STR鑒定)
  • MKN-7人胃癌細(xì)胞(STR鑒定)
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更新時(shí)間:2024-12-07 21:00:08

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MKN-7人胃癌細(xì)胞(STR鑒定)上海淳麥生物科技有限公司是一家專注于研發(fā)和生產(chǎn)免疫細(xì)胞及干細(xì)胞相關(guān)產(chǎn)品的生物高科技企業(yè),致力于打造國內(nèi)原代細(xì)胞研發(fā)和服務(wù)平臺(tái),做“您身邊的細(xì)胞培養(yǎng)專家“。產(chǎn)品涵蓋免疫細(xì)胞及干細(xì)HFF-1 人包皮成纖維細(xì)胞胞、細(xì)胞系、*培養(yǎng)基、無血清培養(yǎng)基、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清、轉(zhuǎn)染試劑、胰酶等細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品。
細(xì)胞名稱:MKN-7 ,人胃癌細(xì)胞
種屬來源:人
組織來源:胃
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基::RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
生長條件:氣相:100%空氣;溫度:37℃
傳代方法:1:2至1:3,每周 3次
凍存條件:無血清細(xì)胞凍存液,液氮儲(chǔ)存
支原體檢測:無
MKN-7人胃癌細(xì)胞(STR鑒定)細(xì)胞培養(yǎng)操作
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)MKN-7人胃癌細(xì)胞(STR鑒定)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,棄去消化液,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
c、按6-8 mL/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心4 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,加 1 mL血清重懸細(xì)胞,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

MKN-7人胃癌細(xì)胞(STR鑒定) 

 

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