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摘要：目的:觀察針刺對大鼠酒精戒斷焦慮樣癥狀的zhi療作用，探究針刺zhi療大鼠酒精戒斷焦慮樣癥 狀的作用機(jī)制。方法：選取健康的SD大鼠，隨機(jī)分組，分為空白組、模型組、三陰交組、足三里組、電針 兩穴（三陰交+足三里）組、針刺兩穴陰交+足三里）組，連續(xù)腹腔注射酒精（ethanol，Eth) 28 d，制備酒 精成癮模型，撤酒精3 d，制備酒精戒斷模型，撤酒精期間分別針刺相應(yīng)穴位進(jìn)行zhi療，針刺3 d，高架十 字迷宮（EPM)測其焦慮行為，ELISA測海馬中促腎上腺皮質(zhì)ji素釋放ji素、環(huán)磷酸腺苷濃度。結(jié)果:與 空白組比較，酒精戒斷大鼠停留在開放臂的次數(shù)和時間明顯減少（P<〇.〇5)，海馬中cAMP、CRH的濃度 明顯升高（P<〇. 01);與模型組相比較，電針兩穴組和針刺兩穴組在EPM開放臂的的停留次數(shù)、時間明 顯地增加（P<〇.〇5)，海馬中cAMP、CRH的濃度明顯降低（P<0.01)，而單穴位組對各檢測指標(biāo)的作用效 果不明顯（P>0.05)$結(jié)論：針刺能緩解酒精戒斷焦慮征大鼠的焦慮，其抗焦慮的作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié) 大鼠腦內(nèi)海馬組織中cAMP-CRH相互作用有關(guān)。

關(guān)鍵詞:針刺;焦慮;酒精戒斷;促腎上腺皮質(zhì)ji素釋放ji素;環(huán)磷酸腺苷

 

實驗儀器

高架十字 迷宮:上海欣軟信息科技有限公司

 

行為學(xué)指標(biāo)測試

實驗室內(nèi)光線昏暗并保持恒亮，室溫24°C，保持 安靜。將每只大鼠置于高空十字架（EPM)的正中央 釋放，每只大鼠測試時間為5 min。每一只動物完成測 試后，清理糞便，并對裝置用酒精進(jìn)行*清潔消du。

測試指標(biāo):進(jìn)入到開放臂次數(shù)（0E):即進(jìn)入到任 ¥開放臂的次數(shù)，以大鼠4個爪均進(jìn)入到臂內(nèi)開始，中 途有1個爪從該臂中*撤出，視為該次進(jìn)入活動完 成;進(jìn)入到開放臂時間（0T):進(jìn)入到開放臂停留的時 間，單位:秒U);進(jìn)入到閉合臂次數(shù)（CE):即進(jìn)入到任 一閉合臂的次數(shù)，以大鼠4個爪均進(jìn)入到臂內(nèi)開始，中 途有1個爪從該臂中*撤出，視為該次進(jìn)入活動完 成;進(jìn)入到閉合臂時間（CT)，進(jìn)入到閉合臂停留的時 間，單位:秒（s)。由以上指標(biāo)分別計算出：①進(jìn)開放 臂次數(shù)比例〇E% = OE“OE+CE) xl〇〇%;②開放臂停 留時間 t匕例 〇T% = OIV(OT+CT) xl〇〇%

 

討論

焦慮征大多是因為臟腑功能失調(diào)、氣機(jī)失常而導(dǎo) 致神志不安，足M里是足陽明胃經(jīng)合穴，f陰交是肝、 腎、脾經(jīng)的交會穴，這兩個穴位既能調(diào)節(jié)所屬臟腑的經(jīng) 氣，同時又針對了焦慮征的病理特點進(jìn)行zhi療。近年 來，三陰交、足S里作為zhi療焦慮征的主要穴位，受到 廣大學(xué)者的關(guān)注。有實驗證明，電針三陰交可緩解自 然更年期大鼠的焦慮行為[6]，針刺足三里可減輕hai洛 因戒斷后所產(chǎn)生的焦慮癥狀，且療效穩(wěn)定[7]。本實驗 中，我們選取了$陰交和足三里進(jìn)行針刺zhi療，觀察到 通過同時針刺這兩個穴位可明顯緩解酒精戒斷所產(chǎn)生 的焦慮癥狀，由此我們猜測針刺這兩個穴位可能存在 相互作用而使zhi療效果得到加強(qiáng)。單穴位的zhi療效果 并未如相關(guān)文獻(xiàn)中所了解的那么顯著，這可能是由于 針刺的天數(shù)和時長不同所導(dǎo)致。電針療法是應(yīng)用電針 儀輸出脈沖電流，通過毫針作用于經(jīng)絡(luò)穴位以達(dá)到治 療ji病目的的一種方法，它將毫針的刺激和電生理的 效應(yīng)相結(jié)合，這種方法不僅可以提高針刺的zhi療效果， 同時還增加了針刺的zhi療范圍，加強(qiáng)了針刺疏通經(jīng)絡(luò) 的作用[8]。有文獻(xiàn)報道[9]，電針zhi療焦慮征的效果與 抗焦慮藥wu的zhi療效果相當(dāng)，且避免了藥wu所帶來的 依賴性等副作用。在本研究中，多項實驗結(jié)果也證實 了電針療法較普通針刺確有更好的療效。

大量的研究結(jié)果顯示，當(dāng)機(jī)體受到內(nèi)外環(huán)境的刺 激時，應(yīng)激反應(yīng)會表現(xiàn)出一系列的神經(jīng)***物質(zhì)的 變化，主要表現(xiàn)為HPA軸的興奮。下丘腦室旁核是HPA-神經(jīng)***軸的中qu位點，CRH則是HPA軸激 活的關(guān)鍵性物質(zhì)。適量的CRH的增多可使機(jī)體處于 興奮的狀態(tài)，但CRH的含量過高時，則可引起適應(yīng)性的機(jī)制障礙，進(jìn)而引發(fā)多種癥狀的發(fā)生，其中包括焦 慮、抑郁等。有研究表明，在應(yīng)激刺激下，CRH的濃度 以及CRH mRNA的表達(dá)均顯著增加[1()]。在焦慮癥狀 中所觀察到的ji素含量的變化主要是由CRH的過度 分泌所導(dǎo)致[11]。新近研究表明，CRH的受體拮抗劑 可作為抗焦慮以及抗抑郁的神經(jīng)藥理學(xué)zhi療方法[12]。 由本實驗結(jié)果我們也觀察到，酒精戒斷焦慮征大鼠的 海馬中CRH的濃度較空白組大鼠均増加，經(jīng)針刺zhi療
后，其數(shù)值又下降至正常水平，由此證實了，CRH在焦 慮的發(fā)生中占有重要的地位。

焦慮征受多種基因和多種環(huán)境因素的調(diào)控，目前 發(fā)現(xiàn)其可能通過一系列的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)級聯(lián)反應(yīng)進(jìn)行調(diào) 控。有研究表明，與G蛋白相偶聯(lián)的cAMP信號傳導(dǎo) 通路的異常與焦慮密切相關(guān)，這一論證從我們的實驗 結(jié)果中得到了證實，酒精戒斷大鼠的cAMP的濃度升 高，針刺zhi療后得到緩解。cAMP是體內(nèi)比較重要的 第二信使，它對多種神經(jīng)遞質(zhì)的功能發(fā)揮起調(diào)節(jié)作用。 近年來，有大量的研究結(jié)果證實，cAMP依賴的PKA 信號通路在酒精依賴的形成過程中具有重要的作用。 環(huán)磷腺苷效應(yīng)元件結(jié)合蛋白（CREB)作為PKA重要 的下游信號蛋白，在藥wu的成癮中也起著尤為重要的 作用，因此，近年，CREB在酒精成癮的相關(guān)研究中成 為又一備受關(guān)注的研究熱點。CREB通過結(jié)合cAMP 效應(yīng)元件（CRE)調(diào)節(jié)基因的轉(zhuǎn)錄，CRE是在各種基因 調(diào)節(jié)區(qū)域中的順式增強(qiáng)子，CRH基因的上游調(diào)節(jié)區(qū)中 存在CRE序列，而且已經(jīng)證實，CRE的功能與CRH的 轉(zhuǎn)錄活性密切相關(guān)，由此為我們的實驗結(jié)果提供證據(jù)： 針刺抗焦慮的作用可能通過調(diào)節(jié)cAMP-CRH相互作 用，終使酒精戒斷焦慮征得到緩解。同時由本實驗結(jié) 果證實了 cAMP、CRH之間可能確存在某種聯(lián)系，共同 調(diào)節(jié)酒精戒斷焦慮征的發(fā)生。

綜上所述，本實驗探究了針刺可緩解酒精戒斷期 間的焦慮樣行為，初步證實針刺可能通過cAMP-CRH 相互作用來緩解酒精戒斷焦慮樣癥狀，為針刺療法開 發(fā)成為防治酒精復(fù)飲的有效zhi療手段提供實驗和理論 依據(jù)，也為綜合利用中醫(yī)療法zhi療其他du品成癮提供強(qiáng)有力的實驗支持。