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中級(jí)會(huì)員 | 第7年

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稀有細(xì)胞和少量細(xì)胞的單細(xì)胞分離

時(shí)間:2020/7/21閱讀:442
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  對(duì)于單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組學(xué),單細(xì)胞蛋白組學(xué)和單細(xì)胞基因組學(xué)而言,高效的單細(xì)胞獲取方式至關(guān)重要。傳統(tǒng)的流式細(xì)胞分選儀是一種常用的細(xì)胞分離工具,但是在實(shí)際操作過程中一些技術(shù)壁壘。除了操作難度高之外,細(xì)胞在傳統(tǒng)流式中分離時(shí)需要經(jīng)過相當(dāng)長(zhǎng)度的共用管路,從而產(chǎn)生了大量的死體積。為了彌補(bǔ)這些損失,就往往需要用到大量的細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。可惜的是,對(duì)于一些稀少的原代細(xì)胞和臨床樣本來說,要滿足這么高的上樣量標(biāo)準(zhǔn)幾乎不可能達(dá)到。因此,我們需要有一種全新的單細(xì)胞分離方式來滿足有限的樣本和稀有含量細(xì)胞的單細(xì)胞分離需求。

        Namocell單細(xì)胞分離儀采用了可拋式的微流控芯片來直接加載分離樣本。當(dāng)細(xì)胞樣本流經(jīng)分離芯片時(shí),采用創(chuàng)新技術(shù)的篩選和分離機(jī)制將有效地減少死體積。在這里我們使用Namocell單細(xì)胞分離儀來測(cè)試單細(xì)胞分離效率。被測(cè)試的是懸浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞兩個(gè)細(xì)胞系,上樣量都是100個(gè)細(xì)胞總量。

     圖中表示的是SP2/0(懸浮細(xì)胞系)和HEK-293細(xì)胞系,分別在不沖洗分離芯片和沖洗分離芯片兩種狀態(tài)下,測(cè)得的100個(gè)細(xì)胞起始量的終分離效率。(n=5

  實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,Namocell單細(xì)胞分離儀在細(xì)胞起始量只有100個(gè)細(xì)胞的情況下,得率高達(dá)80%。因此,這種新型的單細(xì)胞分離平臺(tái)可以說是幾乎零死體積,非常適合用于有限細(xì)胞和稀有細(xì)胞的單細(xì)胞分離。

 

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