產(chǎn)品名稱:MEM(無(wú)酚紅)基礎(chǔ)培養(yǎng)基細(xì)胞
英文名稱:MEM(無(wú)酚紅)
貨號(hào):BJ-01X10004
產(chǎn)品規(guī)格:500ml
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),*進(jìn)口來(lái)源,*保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
豬激活素A(ACVA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒焦碳二乙酯一異 AR,99.0%(S,S)-(+)-N,N′-雙(3,5-二-叔丁亞水楊)-1,2-環(huán)已二 98%
豬分裂周期蛋白23(CDC23)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒焦碳二乙酯 AR,99.8%(R,R)-(?)-N,N′-雙(3,5-二叔丁亞水楊)-1,2-環(huán)已二
豬同線蛋白2(ST2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒4-N,N-二氨偶氮苯-4`-異硫酯三聚 99%二釕(II)二聚體 97%
豬血小板反應(yīng)蛋白4(TSP-4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 4-N,N-二氨偶氮苯-4`-異硫酯1,2- CP,98%雙(環(huán)戊二烯)釕 99%
豬α葡萄糖苷(α-Glu)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 萘酚AS-TR乙酯三乙 standard for GC, ≥99.5% (GC)雙(五環(huán)戊二烯)釕(II) 97%
豬谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移θ1(GSTθ1/GSTt1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒萘酚AS-TR乙酯三乙 AR,99.0%二二羰雙(三苯膦)釕 98%
豬核因子相關(guān)κB結(jié)合蛋白 (NFRκB)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒萘酚AS-TR乙酯三乙 CP,98.0%1,4 -雙(二苯膦)丁烷(1,5環(huán)辛二烯)銠(I)四氟 98%
豬血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 萘酚AS-TR磷鹽三乙 for HPLC, ≥99.5% (GC)雙(1,5-環(huán)辛二烯)-三氟磺銠 98%
豬胃蛋白原A(PGA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒萘酚AS-TR磷鹽三乙 GR,99.5%二化二銠(雙降二烯) 銠 96%
豬粒巨噬集落激因子抗體(GM-CSF Ab)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 萘酚AS-BI磷二鈉三乙 用于氨分析, ≥99.5% (GC)三氟磺銅(Ⅱ) 98%
豬白介素23(IL-23)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒萘酚AS-BI磷二鈉三乙 LC-MS淋洗劑, ≥99.5% (GC)二環(huán)己化膦 97%
豬神經(jīng)生長(zhǎng)因子 (NGF)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 萘酚AS-BI磷二鈉(R)-(-)-3--1,2- 97%1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷 97%
豬著絲粒蛋白B(CENPB)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 單硬脂甘油酯(S)-(+)-3--1,2- 97%二苯環(huán)己膦 98%
豬雌二受體(ER)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 對(duì)羥苯酯(±)-環(huán)氧 96%三氟磺亞銅苯絡(luò)合物(2:1) 99.9%
豬粘蛋白20(MUC20)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒對(duì)羥苯酯氨比林 CP三氟磺亞銅苯絡(luò)合物(2:1) 98%
豬通用轉(zhuǎn)錄因子II A肽1(GTF2A1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒月桂酯土霉素 97%三氟磺亞銅(I)苯聯(lián)合體 (2:1) 90%
MEM(無(wú)酚紅)基礎(chǔ)培養(yǎng)基細(xì)胞還原型輔Ⅱ/磷酰腺嘌呤二核苷抗體紫花前胡素 Naftopidil dihydrochloride
NIT2蛋白抗體紫金蓮(標(biāo)準(zhǔn)品) Irbesartan
神經(jīng)分化因子1抗體紫金龍(標(biāo)準(zhǔn)品) Tegaserod maleate
活化T核因子1蛋白抗體紫蓳靈(標(biāo)準(zhǔn)品) tribendimidine
谷氨受體1抗體紫荊皮(標(biāo)準(zhǔn)品) Jionoside B1
神經(jīng)元抑制蛋白抗體紫萁(標(biāo)準(zhǔn)品) N6022
神經(jīng)發(fā)育相關(guān)調(diào)控蛋白抗體紫色姜(標(biāo)準(zhǔn)品) Balsalazide
核因子κB抑制蛋白α抗體(IκB-α)紫杉(標(biāo)準(zhǔn)品) Epalrestat
磷化核因子NF-κB p65抗體紫蘇梗(標(biāo)準(zhǔn)品) Olsalazine disodium