堿性磷酸酶檢測試劑盒(Alkaline Phosphatase Assay Kit)是一種用于快速、便捷地檢測細(xì)胞或組織樣品的裂解或勻漿產(chǎn)物的上清液、血清、血漿、尿液等樣品中內(nèi)源性的堿性磷酸酶活性的試劑盒。
      堿性磷酸酶(Alkaline Phosphatase, AP/ALP/AKP/ALKP/ALPase/Alk Phos)也稱堿性磷酸酯酶(EC 3.1.3.1)，可以在堿性條件下催化磷酸酯鍵的水解。哺乳動(dòng)物中，肝臟、膽管、腎臟、骨頭和胎盤中的堿性磷酸酶活性比較高。常見的堿性磷酸酶包括腸道堿性磷酸酶(alkaline phosphatase, intestinal, ALPI)、非組織特異性堿性磷酸酶(alkaline phosphatase, tissue-nonspecific isozyme, ALPL)和胎盤堿性磷酸酶(alkaline phosphatase, placental type, 也稱placental alkaline phosphatase, PLAP)。常見的小牛腸堿性磷酸酶(Calf Intestinal Alkaline Phosphatase, CIAP/CIP)被廣泛用于二抗等的標(biāo)記zui終用于蛋白和核酸等的檢測，也常用于DNA或RNA 5'和3'末端的去磷酸化(去單磷酸化)，特別是質(zhì)粒的5'末端去磷酸化以避免質(zhì)粒自連等。
      干細(xì)胞，如iPS中，堿性磷酸酶的活性很高，常被用作iPS成功誘導(dǎo)的標(biāo)志。另外，分化的結(jié)腸癌細(xì)胞中堿性磷酸酶的活性也會顯著升高，被當(dāng)作結(jié)腸癌細(xì)胞分化程度定性和定量的指標(biāo)。此外，血清中堿性磷酸酯酶的升高，被稱作高堿性磷酸酶血癥(hyperalkalinephosphatasemia)，被認(rèn)為和惡性膽管阻塞(malignant biliary obstruction)、原發(fā)性膽管硬化(primary 
biliary cirrhosis)、原發(fā)性硬化膽管炎(primary sclerosing cholangitis)、肝淋巴瘤(hepatic lymphoma)和肝肉瘤(hepatic sarcoidosis)等肝膽疾病密切相關(guān)。血清中堿性磷酸酶活性升高還和骨頭生成密切相關(guān)，因?yàn)閴A性磷酸酶是成骨細(xì)胞的副產(chǎn)物。血清中堿性磷酸酶活性過低也和一些疾病相關(guān)。兒童和孕婦血清中的堿性磷酸酶活性較普通人高一些。血清中堿性磷酸酶活性范圍在20-140U/L。
      除胎盤堿性磷酸酶(alkaline phosphatase placental isoform)以外，其它的內(nèi)源性堿性磷酸酶加熱后易失活。
      堿性磷酸酶檢測試劑盒可以檢測細(xì)胞或組織的裂解液或勻漿液、血漿、血清、尿液或純化的酶樣品等中的堿性磷酸酶活性。
      Para-nitrophenyl phosphate (pNPP)是一種常用的磷酸酶顯色底物，在堿性條件下，可在堿性磷酸酶作用下生成para-
nitrophenol。para-nitrophenol(p-nitrophenol)在堿性條件下，呈黃色產(chǎn)物，可以在400-415nm檢測吸光度。產(chǎn)物黃色越深， 說明堿性磷酸酶檢活性越高，反之則酶活性越低。據(jù)此通過比色分析就可以計(jì)算出堿性磷酸酶活性水平。
      包括標(biāo)準(zhǔn)品和空白對照，本試劑盒共可進(jìn)行100個(gè)樣品的檢測。
包裝清單：
產(chǎn)品編號    產(chǎn)品名稱    包裝
P0321-1    檢測緩沖液    15ml
P0321-2    顯色底物    2管
P0321-3    p-nitrophenol溶液(10mM)    0.1ml
P0321-4    反應(yīng)終止液    12ml
—    說明書    1份
保存條件：
      -20℃保存，一年有效。其中顯色底物和p-nitrophenol溶液需避光保存。
注意事項(xiàng)：
      如果希望進(jìn)行酶活性的定量，進(jìn)行酶反應(yīng)時(shí)必須注意精確計(jì)時(shí)。此時(shí)推薦采用孵育30分鐘等較長的時(shí)間，以減小操作過程中的時(shí)間誤差。同時(shí)如果樣品中酶活性較高，則可以預(yù)先適當(dāng)稀釋樣品。
      樣品溶液中須避免出現(xiàn)EDTA、氟離子、檸檬酸鹽等堿性磷酸酶的抑制劑。
      檢測緩沖液和p-nitrophenol溶液對人體有害，操作時(shí)請小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。反應(yīng)終止液有腐蝕性，操作時(shí)請小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或腐蝕其他物品。
      僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
      為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。