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目錄:鏡像綺點(上海)細胞技術(shù)有限公司>>細胞分類>>細胞系>> iCell-h3202V6.11 人胚腎細胞/STR鑒定

2V6.11 人胚腎細胞/STR鑒定
  • 2V6.11 人胚腎細胞/STR鑒定
參考價 1500
訂貨量 ≥1
具體成交價以合同協(xié)議為準
1500
≥1
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 品牌 Cellverse
  • 型號 iCell-h320
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市
屬性

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更新時間:2025-03-12 15:41:46瀏覽次數(shù):972評價

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2V6.11 人胚腎細胞/STR鑒定
2V6.11 人胚腎細胞介紹
這株細胞是2001年從人胚腎細胞株293衍化而來。293細胞用攜帶Zeocin-抗性標記的質(zhì)粒pVgRXR轉(zhuǎn)染得到293pVgRXR細胞。隨后,用包含編碼E424K的Ad5E4ORF6基因的質(zhì)粒pEKORF6轉(zhuǎn)染。

2V6.11 人胚腎細胞/STR鑒定細胞介紹

這株細胞是2001年從人胚腎細胞株293衍化而來。293細胞用攜帶Zeocin-抗性標記的質(zhì)粒pVgRXR轉(zhuǎn)染得到293pVgRXR細胞。隨后,用包含編碼E424K的Ad5E4ORF6基因的質(zhì)粒pEKORF6轉(zhuǎn)染。pEKORF6從包含潮霉素抗性基因的質(zhì)粒pIndHydro衍生而來。載體包含SV40病毒序列。

2V6.11細胞株初從含潮霉素的培養(yǎng)液中用克隆環(huán)分離單克隆得到。2V6.11細胞誘導表達的人腺病毒E434KDa蛋白可通過免疫印跡法檢測。這株細胞可以用作研究腺病毒E4癌基因的工具。


細胞特性
1) 來源:人胚胎腎臟
2) 形態(tài):上皮細胞樣,貼壁生長
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存

可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式

(1)干冰運輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;

(2)存活細胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。

(3)收到細胞后請拍照,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們聯(lián)系。

細胞用途:僅供科研使用。

2V6.11 人胚腎細胞/STR鑒定接收后的處理:
1) 收到細胞后,請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2) 在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)時,在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態(tài)請在10X和20×物鏡下,同時給剛收到的細胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為細胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3) 觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h。
4) 貼壁細胞:在運輸過程中貼壁細胞會有脫落的現(xiàn)象,如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長,可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中(或新的培養(yǎng)瓶中)。
5) 懸浮細胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基)。
6)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后di一次傳代建議1:2傳代 。

                     
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1) 準備MEM(推薦iCell-0012)培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗 1%
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%FBS,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。

下面T25瓶為類;

1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入1ml*培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度1-2xE6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

鏡像綺點(上海)細胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù):

一、原代細胞服務(wù)
      各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源;
      多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源;
      原代細胞分離和培養(yǎng)相關(guān)試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等;
      原代細胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)和整體實驗外包服務(wù);

二、細胞株/系服務(wù)
      細胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關(guān)說明書;
      細胞系培養(yǎng)過程的技術(shù)指導;
      細胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關(guān)生長因子、試劑等;

三、iPS細胞
      iPS細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層在);
      iPS細胞增殖及冷凍保存;
      iPS基礎(chǔ)培養(yǎng)技術(shù)實習;
      新藥及實驗儀器上市前評估;

四、技術(shù)外包服務(wù):各類細胞生物學實驗、分子生物學實驗、顯微鏡拍照服務(wù)等

五、其他:根據(jù)客戶需要定制服務(wù)等


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