Hoechst 33342染液(即用型)公司正在出售的產(chǎn)品：E.coli DH-5 Alpha DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體月桂酯 99%
E.coli O157:H7 大腸桿菌埃希氏菌O157抗體（腸出血性大腸桿菌埃希氏菌O157:H7）月桂酯 Standard for GC,≥99.5% (GC)
EPEC/E.coli 腸致病性大腸桿菌抗體十二酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品
E.coli/EPEC

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

骨成型蛋白10(BMP10)英文名稱：BMP10 ELISA Kit前列環(huán)合成抗體包裝500g

谷胱甘肽過氧化1(GPX1)英文名稱：GPX1 ELISA Kit軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗體包裝5g

谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移ω1(GSTω1)英文名稱：GSTω1 ELISA KitT淋巴CD1A抗體包裝50MG

谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移θ2(GSTθ2)英文名稱：GSTθ2 ELISA Kit磷化周期B1抗體包裝25g

谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移θ1(GSTθ1)英文名稱：GSTθ1 ELISA Kit胞漿型磷脂A2抗體包裝5g

谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移α4(GSTα4)英文名稱：GSTα4 ELISA Kit膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白抗體包裝1g

谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移α1(GSTα1)英文名稱：GSTα1 ELISA Kit緊密連接蛋白6抗體包裝100g

谷胱甘肽(GSH)英文名稱：GSH ELISA Kit磷化緊密連接蛋白6抗體包裝25g

谷光甘肽合成(GSS)英文名稱：GSS ELISA Kit著絲粒蛋白T抗體包裝5g

谷轉(zhuǎn)(ALT)英文名稱：ALT ELISA Kit染色體相關(guān)蛋白2抗體包裝1g

谷酰胺2(GLS2)英文名稱：GLS2 ELISA Kit著絲粒蛋白P抗體包裝5g

谷酰胺(GLS)英文名稱：GLS ELISA Kit分裂周期相關(guān)蛋白5抗體包裝250mg

谷酰胺合成(GS)英文名稱：GS ELISA Kit染色體相關(guān)蛋白2抗體包裝1g

谷脫羧2(GAD2)英文名稱：GAD2 ELISA Kit周期調(diào)控因子10抗體包裝250mg

谷脫氫(GDH)英文名稱：GDH ELISA Kit中心體蛋白97kDa抗體包裝100mg

辣椒Colletotrichum│capsici (Syd.) E.J. Butler & Bisby 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品載脂蛋白L1試劑盒亞油酯;Methyl Linolea

白色類諾卡氏菌Nocardioides│albus 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR，可用于培養(yǎng)載脂蛋白H試劑盒油酯;Methyl Oleate

假格里朗蒼白桿菌Ochrobactrum│pseudogrignonense 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品載脂蛋白E試劑盒硬脂酯;Methyl Stearat
Hoechst 33342染液(即用型)豇豆慢生根瘤 4-氯-2,3-二氟心鈉肽Elisa

嗜熱鏈球 2-基-N-乙基乙酰白脂Elisa

新疆鹽地桿屬 2-乙烯苯酸血小板CD41-IgG抗體Elisa

桃色枝頂孢 2-氯-3-甲血小板相關(guān)IgG抗體Elisa

腸桿屬 9-氨基米諾環(huán)鹽酸鹽炭疽桿抗體Elisa

游動(dòng)球?qū)?/span> 6-氨基-3-乙基苯酚鹽酸鹽25羥基膽固Elisa

膠孢 2-氯嘧啶-4-甲酸甲酯胃脂Elisa

Herbaspirillum canariense 2-氯-4-嘧啶甲酸熱休克蛋白糖蛋白96Elisa

檸檬假絲酵母 3-(3-溴苯基)吡唑干擾-a-2bElisa

*杏葉斑鏈格孢 2-氟肉桂生長(zhǎng)相關(guān)蛋白Elisa

青霉屬 N-Boc-2-乙酸鞘糖脂Elisa

孟氏假單胞 蒽醌-1,8-二磺酸二環(huán)磷酰Elisa

石面單胞 N-1-Boc-N-4-Cbz-2-哌甲酸型肝炎病核心抗原Elisa

摩洛哥芽孢桿 三[2-對(duì)甲苯基吡啶-C2,N‘]銥(III)胰島受體底物1磷酸化Elisa

巨大芽胞桿 1-乙氧羰基吡咯烷-3-酮胰島受體底物2磷酸化Elisa