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商品介紹：
細胞中的細胞核是由酸性物質(zhì)組成，它與堿性染料的親和力較強；而細胞漿則相反，它含有堿性物質(zhì)和酸性染料的親和力較大。巴氏染色液利用這一特性對細胞進行多色性染色，細胞經(jīng)染色后能清晰地顯示細胞的結(jié)構(gòu)，胞質(zhì)透亮鮮麗，各種顆粒分明，細胞核染色質(zhì)非常清楚，從而較容易發(fā)現(xiàn)異常細胞。通過巴氏染色可反映出細胞在炎癥刺激下和癌變后的形態(tài)學變化，對早期發(fā)現(xiàn)和診斷一些病變和腫瘤具有較重要意義。 巴氏染色法是臨床細胞學檢查常用的傳統(tǒng)染色方法，在婦科檢查中，巴氏染色細胞學檢查是宮頸癌及癌前病變的較常用篩查方法。同時巴氏染色還可觀察女性激素水平和檢測生殖道病原體如念珠菌、滴蟲等的感染。其中EA50染液為EA36的改良型，其操作方法與EA36相同。一般認為，EA36和EA50較適用于婦科標本，改良EA65染液較常用于非婦科標本(如胸、腹水等脫落細胞)。 儲存條件：室溫密封保存。 有效期：六個月。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
400ml | 1～3天 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
花錨（標準品）英文名稱： Boron solutionG蛋白偶聯(lián)受體RTA蛋白抗體包裝5g
花旗松,二氫槲皮(標準品)英文名稱： Bismuth solutionG蛋白偶聯(lián)受體GPR155蛋白抗體包裝1g
花生紅衣（標準品）英文名稱： Copper solutionG蛋白偶聯(lián)受體GPR30蛋白抗體包裝5g
華北大黃（標準品）英文名稱： Copper solutionG蛋白偶聯(lián)受體GPR86蛋白抗體包裝500mg
華佩蘭（標準品）英文名稱： Chromium solutionG蛋白偶聯(lián)受體HM74蛋白抗體包裝25g
化橘紅(柚)（標準品）英文名稱： Chromium solution樣蛋白1樣蛋白抗體包裝5g
槐定堿（標準品）英文名稱： Chromium solution磷化接頭蛋白Gab 2抗體包裝25g
槐耳菌質(zhì)（標準品）英文名稱： Cobalt standard磷化接頭蛋白Gab2抗體包裝5g
槐果堿（標準品）英文名稱： Cobalt standard干擾/維誘導(dǎo)凋亡相關(guān)基因抗體包裝1g
槐花（標準品）英文名稱： Dysprosium standard磷化接頭蛋白Gab 2抗體包裝250mg
槐黃英文名稱： Europium standard多肽N-乙?；肴樘寝D(zhuǎn)移13抗體包裝100g
槐角（標準品）英文名稱： Fluoride standard銜接蛋白γ/γ1-Adaptin抗體包裝25g
槐角苷;槐屬苷(標準品)英文名稱： Fluoride standard半乳糖瓦爾登轉(zhuǎn)化抗體包裝5g
槐米（標準品）英文名稱： Gold standard半乳糖凝集10抗體包裝25g
獾油（標準品）英文名稱： Germanium standard半乳糖激2抗體包裝5g
豬鏈球菌Streptococcus│suis 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,可用于培養(yǎng)熱休克蛋白糖蛋白96試劑盒α-蒎烯;α-Pinene
平滑假絲酵母Candida│parapsilosis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP33,可用于培養(yǎng)熱休克蛋白90kDaβ試劑盒蒲公英賽;Taraxerol
ATCC09027=LMG8029=CGMCC1.2421資源名稱: 銅綠假單胞菌 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品熱休克蛋白75 kDa,線粒體試劑盒哌異黃;Scandine
巴氏染色試劑盒(EA65)干酪乳桿 3-乙酰-2,4-二甲基-5乙氧羰基吡咯異質(zhì)性胞核核糖核蛋白KElisa
少根根霉東京變種 (+)-1,4-二-O-芐基-D-蘇糖硫酸軟骨Elisa
類阿達青霉 Nα-苯甲酰-DL-精氨酰-β-萘阿立新BElisa
膠孢 DiOC2(3) [3,3'-Diethyloxacarbocyanine Iodide]晶狀體蛋白αAElisa
田菁根瘤 2-氟-3-甲基吡啶-5-酸CHO宿主蛋白Elisa
橙黃色擲孢酵母 (±)-BOC-A-膦?；拾彼狨?95%鸚鵡衣原體抗體Elisa
嗜糖黃桿 二氯(2-吡啶甲酸)金克氏錐蟲抗體Elisa
皺褶假絲酵母 (S)-5-氧代四-3-氨酸芐酯β-羥基丁酸Elisa
托魯斯山鏈霉 2-Dicyclohexylphosphino-2′,4′,6′-triisopropylbiphe血管生成樣蛋白1Elisa
鏈卵屬 氯[2-(二叔丁基磷)二苯基]金谷氨酸脫羧2Elisa
腸沙門氏腸亞種波那雷恩血清型 1 - （4,4 - 二苯基-3 - 基）- 3 -鹽酸鹽卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白2Elisa
大腸埃希氏桿 2-(4-聯(lián)苯基)-5-苯基-1,3,4-噁二唑角蛋白6BElisa
熒光假單胞 2-氨基-5-溴噻唑-4-甲酸甲酯磷酸核糖焦磷酸?；D(zhuǎn)移Elisa
稻平臍蠕孢 單丁基三異辛酸錫相關(guān)血漿蛋白AElisa
北京擲孢酵母 2-氯-D-苯氨酸樁蛋白2Elisa
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