永生化人肝癌血管內(nèi)皮細胞系；ECDHCC-1保存條件冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。

細胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件   10%FBS
傳代方法  無
傳代情況 1:3傳代，3-4天傳1次
凍存條件  C5
支原體檢測 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
STR  陰性
同工酶 
染色體  未做
培養(yǎng)溫馨提示：
1）公司努力實現(xiàn)為科學研究提供實驗細胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實驗細胞及其子代，不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2）公司細胞資源中心承諾盡zui大努力對實驗細胞資源相關(guān)信息進行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件，中心不保證其準確性。
3）從文獻等處引用的信息本中心未進行核實，僅供參考。
4）使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī)，充分考慮可能存在的風險和責任，采取適當?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

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