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轉(zhuǎn)化細胞每個階段有個過渡期
閱讀：197 發(fā)布時間：2017-11-20轉(zhuǎn)化細胞存活率和細胞密度
細胞在對數(shù)生長期中期快速分裂，且在適應(yīng)過程開始時，存活率大于90%。這一點至關(guān)重要。當細胞需傳代時，建議采用1:2或1:3的小傳代比例，以維持更高的細胞密度，同時提供隔絕期間可能有助于細胞的細胞生長因子。當細胞適應(yīng)新的培養(yǎng)條件時，在增大細胞傳代密度。
細胞生長
如果在適應(yīng)過程中，細胞停止了生長，則需讓細胞有更多的時間來適應(yīng)培養(yǎng)基組合。例如，在方法1的階段4，向無血清培養(yǎng)基添加少量的血清(1-3%)。這樣有助于細胞更容易地適應(yīng)新的培養(yǎng)基。然后，在幾個過渡期內(nèi)，緩慢地減少血清量，直至學清量為0。
懸浮培養(yǎng)物
Meiatech公司的無血清培養(yǎng)基和無蛋白培養(yǎng)基不含血清中所發(fā)現(xiàn)的細胞附著延伸影子。在一段過渡期內(nèi)，貼壁細胞將開始離開表面，并成為懸浮細胞系開始生長。細胞也可能因適應(yīng)而發(fā)生形態(tài)變化。監(jiān)測細胞的生長速度，只要細胞能夠與新系統(tǒng)相融合，任何形態(tài)變化都不重要。
細胞叢
在適應(yīng)于無血清培養(yǎng)期間，細胞容易形成叢。傳代培養(yǎng)時，將叢輕輕折斷，使其分散開。將培養(yǎng)物從靜止細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)轉(zhuǎn)移到可旋轉(zhuǎn)錐形瓶內(nèi)，這樣可能會有助于防止細胞叢的形成。
抗生素
由于血清蛋白易于粘合到抗生素上，因此，不建議在無血清適應(yīng)過程中使用抗生素。如不存在血清蛋白，則抗生素水平可能會對細胞產(chǎn)生毒性。
預(yù)防措施
轉(zhuǎn)化細胞確保在開始適應(yīng)過程前，儲存有大量原培養(yǎng)基的細胞。如果細胞沒有存活到下一階段，則在整個過程中保存每一階段使用的培養(yǎng)瓶。
羅庫溴銨標準品 250mg Rocuronium Bromide 119302-91-9
氫溴酸東莨菪堿標準品 250mg Scopolamine Hydrobromide 6533-68-2
司他夫定標準品 250mg Stavudine 3056-17-5
他布比妥標準品 250mg Talbutal CIII DISCONTINUED
戊硫代巴比妥標準品 250mg Thiopental CIII 76-75-5
替沃噻噸標準品 250mg Thiothixene 3313-26-6
延胡索酸泰妙菌素標準品 250mg Tiamulin Fumarate 55297-96-6
曲安西龍標準品 250mg Triamcinolone 124-94-7
竹桃霉素三乙酸酯標準品 250mg Troleandomycin 2751/9/9
N-乙酰-L-色氨酸標準品 250mg Tubocurarine Chloride 6989-98-6
酪氨酸標準品 250mg Tylosin 1401-69-0
DL-α-生育酚標準品 250mg 1959/2/9
轉(zhuǎn)化細胞