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自噬在轉(zhuǎn)化細(xì)胞冷應(yīng)激中的作用研究討論
閱讀：131 發(fā)布時間：2017-9-13轉(zhuǎn)化細(xì)胞這些研究闡明了自噬的新功能, 開辟了新的研究方向, 也給了我們將自噬運用于低溫脅迫研究的靈感。本文對自噬的特異基因LC3進行標(biāo)記, 通過檢測自噬小體*的LC3II自噬熒光點監(jiān)測自噬出現(xiàn)的時間與強度。隨后, 將HeLa細(xì)胞放置于不同溫度的低溫培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng), 模擬自然界中的急性冷刺激。
在這種急性冷刺激下, HeLa細(xì)胞出現(xiàn)了不同程度的自噬熒光點聚集, 證實了低溫可以誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生自噬, 且溫度越低, 出現(xiàn)自噬的時間越早, 出現(xiàn)的自噬程度越強。結(jié)合細(xì)胞低溫下的存活率結(jié)果, 發(fā)現(xiàn)細(xì)胞自噬狀態(tài)與細(xì)胞存活狀態(tài)之間密切相關(guān), 在低溫脅迫下, 細(xì)胞先啟動自噬, 當(dāng)細(xì)胞內(nèi)的自噬慢慢減弱并開始消失時, 細(xì)胞開始出現(xiàn)死亡。
為了確定在低溫脅迫下, 細(xì)胞內(nèi)自噬所擔(dān)當(dāng)?shù)慕巧? 使用 Bafilomycin A1阻斷了轉(zhuǎn)化細(xì)胞自噬。自噬阻斷后, 低溫脅迫下的細(xì)胞提前開始死亡, 且細(xì)胞的存活率較未阻斷的細(xì)胞出現(xiàn)顯著性下調(diào)。這證明了細(xì)胞受到急性冷刺激時, 自噬可以保護細(xì)胞, 維持細(xì)胞的存活, 而這種保護開始減弱時, 細(xì)胞便開始死亡。
為了深入了解低溫下自噬保護細(xì)胞的可能機制, 根據(jù)文獻資料, 測定了細(xì)胞內(nèi)的ROS。在低溫下, 細(xì)胞內(nèi)的ROS出現(xiàn)顯著上調(diào), Bafilomycin A1阻斷了細(xì)胞內(nèi)的自噬后, 細(xì)胞內(nèi)的ROS處于更高的水平。這些結(jié)果說明, 細(xì)胞在受到急性冷刺激后, 通過自噬來清除受損的線粒體, 進而影響細(xì)胞內(nèi)的ROS 水平。而低溫誘導(dǎo)的自噬對細(xì)胞內(nèi)ROS水平的影響可能參與了對細(xì)胞的保護作用, 其細(xì)節(jié)仍有待進一步研究。
4,7-Dimethyl-1,10-phenanthroline CAS號： 3248-05-3 質(zhì)量規(guī)格： 4,7-二甲基-1,10-鄰二氮雜菲(>98.0%(T)) 英文名稱： >98.0%(T)
4-[(4-Methoxybenzylidene)amino]benzonitrile CAS號： 13036-19-6 質(zhì)量規(guī)格： 4-[(4-甲氧基苯亞甲基)氨基]氰苯(>98.0%(T)) 英文名稱： >98.0%(T)
4-[(4-Methoxybenzylidene)amino]cinnamic Acid CAS號： 25959-50-6 質(zhì)量規(guī)格： 4-[(4-甲氧基苯亞甲基)氨基]肉桂酸(>98.0%(T)) 英文名稱： >98.0%(T)
4-[(tert-Butoxycarbonylamino)methyl]pyridine-2-carboxylic Acid CAS號： 260970-57-8 質(zhì)量規(guī)格： 4-[(叔丁氧羰氨基)甲基]吡啶-2-羧酸(>96.0%(HPLC)(T)) 英文名稱： >96.0%(HPLC)(T)
4-[2-(5-Ethyl-2-pyridinyl)ethoxy]benzenepropanoic Acid Ethyl Ester(Pioglitazone Impurity) CAS號： 868754-42-1 質(zhì)量規(guī)格： 4-[2-(5-乙基-2-吡啶基)乙氧基]benzenepropanoic acide 乙酯(匹格列酮雜質(zhì)) 英文名稱： 美國進口
4-[3-(Methylamino)-1-(2-thienyl)propyl]-1-naphthalenol Hydrobromide (Duloxetine Impurity) CAS號： 949096-01-9 質(zhì)量規(guī)格： 4-[3-(甲氨基)-1-(2-噻吩基)丙基]-1-萘酚氫溴酸鹽 (度洛西汀雜質(zhì)) 英文名稱： 美國進口
4-Acetamido-2,2,6,6-tetramethylpiperidine 1-Oxyl Free Radical CAS號： 14691-89-5 質(zhì)量規(guī)格： 4-乙酰氨基-2,2,6,6-四甲基哌啶1-氧基自由基(>98.0%(GC)) 英文名稱： >98.0%(GC)
4-Acetaminophen Sulfate Potassium Salt CAS號： 32113-41-0 質(zhì)量規(guī)格： 4-對乙酰氨基酚硫酸鉀鹽 英文名稱： 美國進口
轉(zhuǎn)化細(xì)胞