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淀粉磷酸化酶(SP)測試盒紫外分光光度法

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    上海市

規(guī)格
50管/48樣810元15 盒 可售
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更新時間:2025-03-03 18:24:19瀏覽次數(shù):282

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50管/48樣
貨號 GOY-SH172-B 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研研究實驗 檢測方法 紫外分光光度法
產(chǎn)品類別 淀粉系列 品牌 谷研
貨期 現(xiàn)貨    
淀粉磷酸化酶(SP)測試盒紫外分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:潰蝕齒密螺旋體PCR檢測試劑盒文氏密螺旋體PCR檢測試劑盒布氏旋毛蟲PCR檢測試劑盒米氏旋毛蟲PCR檢測試劑盒鄉(xiāng)土旋毛蟲PCR檢測試劑盒巴布亞旋毛蟲PCR檢測試劑盒偽旋毛蟲PCR檢測試劑盒旋毛蟲PCR檢測試劑盒旋毛蟲通用PCR檢測試劑盒木霉屬通用PCR檢測試劑盒胎兒滴蟲PCR檢測試劑盒鴿毛滴蟲PCR檢測試劑盒

詳細介紹

淀粉磷酸化酶(SP)測試盒紫外分光光度法

淀粉磷酸化酶(SP)測試盒紫外分光光度法

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗,不做其他科學(xué)實驗外的使用!
商品屬性:
淀粉磷酸化酶(SP)測試盒紫外分光光度法

貨號

GOY-SH172-B

檢測方法

紫外分光光度法

規(guī)格

50管/48樣

產(chǎn)品類別

淀粉系列


測定意義:

淀粉磷酸化酶(SP)測試盒紫外分光光度法

淀粉磷酸化酶(Starch Phosphorylase,SP)是淀粉代謝過程的可逆反應(yīng)酶,既可催化淀粉的合成,也可催化淀粉的分解。

在高等植物中,淀粉磷酸化酶(合成方向)主要存在于質(zhì)體中,負責延長淀粉的 α-1,4-葡萄糖鏈的非還原末端;淀粉磷酸化酶(分解方向)主要存在于細胞質(zhì)基質(zhì)中,催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵磷酸解產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸,負責葡萄糖鏈的磷酸解,是淀粉代謝過程中的關(guān)鍵酶。

在植物體中,淀粉磷酸化酶分解方向的底物無機磷濃度比合成方向的底物葡萄糖-1-磷酸濃度幾乎高了兩個數(shù)量級,一般認為淀粉磷酸化酶只催化淀粉的分解,因此,分解方向的淀粉磷酸化酶具有重要測定意義。

測定原理:

淀粉磷酸化酶催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵與無機磷反應(yīng)產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸,葡萄糖-1-磷酸在磷酸葡萄糖變位酶的作用下產(chǎn)生葡萄糖-6-磷酸,并在6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化下還原NADP+產(chǎn)生NADPH,使340nm下吸光值增加。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液一:液體 100mL×1 瓶,4℃保存。

提取液二:液體 100mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:粉劑×1 瓶,-20℃保存;

試劑二:液體 20mL×1 瓶,4℃保存;

試劑三:液體 14uL×1 支,4℃保存;

組織樣本的前處

①總 GAPDH 酶提?。航ㄗh稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時間 1min),然后 4℃,8000g 離心 10min,取上清測定。

②胞漿和葉綠體 GAPDH 酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10的比例(建議稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一),冰浴勻漿后于 4℃,200g 離心 5min,棄沉淀,取上清4℃,8000g 離心 10min,取上清用于測定胞漿 GAPDH 酶活性,取沉淀加 1mL 提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時間 1min),然后 4℃,8000g 離心 10min,取清測定葉綠體中 GAPDH 酶活性。建議測定總 GAPDH 酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的GAPDH,則按照步驟②提取粗酶液。細菌或培養(yǎng)細胞的前處理先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104個):提取液一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

淀粉磷酸化酶(SP)測試盒紫外分光光度法

測定步驟:
淀粉磷酸化酶(SP)測試盒紫外分光光度法

1、 分光光度計或酶標儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 340nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 樣本測定

(1)工作液的配制:將試劑二全部倒入試劑一瓶中,充分溶解,37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)預(yù)熱 10 分鐘;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

(2)在試劑三中加入 500μL 蒸餾水,充分混勻待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

(3)在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 5μL 樣本、5μL 試劑三和 190μL 工作液,混勻,加入最后一個試劑的同時開始計時,記錄 340nm 處 20s 時的吸光值 A1 和 5min20s 后的吸光值 A2,計算 ΔA=A1-A2。

GAPDH 活性計算

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

(1)按樣本蛋白濃度計算

單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=1286×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算

單位的定義:每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T=1286×ΔA÷W

(3)按細菌或細胞密度計算

單位的定義:每一萬個細菌或細胞每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 樣÷V 樣總) ÷T=2.572×ΔA

V 反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.005 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細菌或細胞總數(shù),500 萬。

b.用 96 孔板測定的計算公式如下

(1)按樣本蛋白濃度計算

單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=2572×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算

單位的定義:每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T=2572×ΔA÷W

(3)按細菌或細胞密度計算

單位的定義:每一萬個細菌或細胞每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 樣÷V 樣總) ÷T=5.144×ΔA

V 反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103L / mol /cm;d:96 孔板光徑,0.5cm;V 樣:加入樣本體積,0.005 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細菌或細胞總數(shù),500 萬。

生化試劑盒的使用注意事項:
淀粉磷酸化酶(SP)測試盒紫外分光光度法

選擇合適的試劑盒:根據(jù)實驗?zāi)康暮蜋z測對象選擇合適的試劑盒,確保實驗的準確性和可靠性。

嚴格遵循說明書:按照試劑盒的說明書進行操作,避免誤用或浪費。

注意保存條件:按照試劑盒的保存條件進行妥善保存,避免陽光直射、高溫或潮濕等不利因素。

控制實驗條件:在實驗過程中嚴格控制實驗條件,如溫度、時間、pH值等,以確保實驗結(jié)果的穩(wěn)定性。

公司正在出售的產(chǎn)品:
淀粉磷酸化酶(SP)測試盒紫外分光光度法

β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)測試盒可見分光光度法

海藻糖6磷酸合成酶(TPS)測試盒

異檸檬酸裂解酶(ICL)測試盒

海藻糖6磷酸酯酶(TPP)測試盒

還原糖含量測試盒

海藻糖含量測試盒

還原型抗壞血酸(AsA)/維生素C含量測試盒

海藻糖合成酶(TS)測試盒

吲哚乙酸氧化酶測試盒

海藻糖酶測試盒

游離脂肪酸含量(FFA)測試盒

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游離脂肪酸含量(FFA)測試盒測植物組織

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人白介素8受體αELISA試劑盒

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游離脂肪酸含量(FFA)測試盒

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游離脂肪酸含量(FFA)測試盒測植物組織

RAR相關(guān)孤兒素受體γELISA試劑盒

過氧化氫酶(CAT)測試盒(鉬酸銨比色法)

淀粉磷酸化酶(SP)測試盒紫外分光光度法人海藻糖ELISA試劑盒

過氧化氫酶(CAT)測試盒(紫外吸收法)

人外異蛋白AELISA試劑盒

過氧化物酶(POD)測試盒

人顆粒KELISA試劑盒

訂購流程:
淀粉磷酸化酶(SP)測試盒紫外分光光度法

1、訂購前,請與銷售員核對產(chǎn)品中文名稱/CAS號/英文名稱等。

2、我司大部分產(chǎn)品都是現(xiàn)貨,產(chǎn)品核實好下單后即可當天發(fā)貨。(庫存信息以當日為準)如有特殊要求請在發(fā)貨前與銷售員聯(lián)系。

3、我司產(chǎn)品支持款到發(fā)貨、快遞代收尾款、網(wǎng)上現(xiàn)拍等付款方式。

4、質(zhì)量保證,嚴格把關(guān),如有產(chǎn)品異議經(jīng)公司鑒定確認后可包換包退,免除客戶后顧之憂。

5、我司提供完善的售后服務(wù),使用過程中如有任何疑問,可提供技術(shù)指導(dǎo)。


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