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SK-N-AS (神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)

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更新時(shí)間:2025-02-28 12:48:08瀏覽次數(shù):734

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X0607 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
SK-N-AS (神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 的相關(guān)*:F. solani RFLP基因分析試劑盒 20次
Helicobacter pylori RFLP基因分析試劑盒 20次
M. tuberculosis RFLP基因分析試劑盒 20次
M. marinum RFLP基因分析試劑盒 20次
M. scrofulaceum RFLP基因分析試劑盒 20次
M. avium RFLP基因

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性: 

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

SK-N-AS (神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0607

商品介紹:

名稱    SK-N-AS (神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)  

別稱SKN-AS; SKNAS

種屬人類

年齡(性別)女性,6

組織來源腦神經(jīng)母細(xì)胞瘤,轉(zhuǎn)移部位骨髓

生長特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

背景描述Bone marrow metastasis from a child with poorly differentiated embryonal neuroblastoma.

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基DMEM10% FBS1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:8

推薦換液頻率2~3/

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37℃

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

QQ截圖20210907103850.png

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 PRC1 基因全長ORF克隆

 NRP1 轉(zhuǎn)錄變體3 基因全長ORF克隆

 AOAH 基因全長ORF克隆

 AMY2A 基因全長ORF克隆

 CETP 基因全長ORF克隆

 BPIFB1 / C20ORF114 基因全長ORF克隆

 CCDC47 基因全長ORF克隆

 LILRA2 基因全長ORF克隆

 CPN1 基因全長ORF克隆

 LCAT 基因全長ORF克隆

SK-N-AS (神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 改良卵黃瓊脂基礎(chǔ) 英文名稱:Mannitol-Egg-Yolk-Polymycin Agar Base,Modified 產(chǎn)品規(guī)格:250g

0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Kin of IRRE-like protein 1

酵母浸出物葡萄糖土瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱:Yeast Extract Glucose Oxytetracycline Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g

31.2-2000 pg/mL 人干擾素誘導(dǎo)35蛋白(Ifi-35)ELISA試劑盒

0.312-20 ng/mL 人晶狀體蛋白αA(CRYαA)ELISA試劑盒

15.6-1000 pg/mL 人Izumo精卵融合蛋白1 ELISA試劑盒

78-5000 pg/mL 人轉(zhuǎn)錄因子7類似物2(TCF7L2)ELISA試劑盒

31.2-2000 pg/mL 人視錐蛋白樣蛋白1(VSNL1)ELISA試劑盒

3.9-250 pg/mL ELISA Kit for Human Interferon-inducible protein AIM2

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Interleukin-17 receptor B

 


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