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小鼠腹膜間皮細胞

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更新時間:2025-02-27 08:50:50瀏覽次數(shù):256

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X1199 應用領域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
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藍藻甲磺酸乙脂突變誘導試劑盒 10次
小量微藻基因組DNA萃取試劑盒(高多糖/) 20次
大量微藻基因組DNA萃取試劑盒(高多糖/) 5次
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詳細介紹

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

產(chǎn)品屬性:   

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

小鼠腹膜間皮細胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X1199

商品介紹:

名稱    小鼠腹膜間皮細胞   

2.組織來源:腹膜組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:

小鼠腹膜間皮細胞分離自腹膜組織;腹膜是存在于高等脊椎動物腹腔中的一層黏膜,主要由間皮細胞構成,藉由結締組織的支持所形成的一層膜狀組織。腹膜包覆大部分腹腔內(nèi)的器官,能分泌黏液潤濕臟器的表面,減輕臟器間的摩擦。腹腔臟器的血液、淋巴和神經(jīng)組織經(jīng)由腹膜與外界相連;腹膜也具有吸收撞擊保護內(nèi)臟的效果。腹膜(peritoneum)為全身面積最大、配布最復雜的漿膜,由皮及少量結締組織構成,薄而光滑,呈半透明狀。襯于腹、盆腔壁內(nèi)表面的腹膜稱為壁腹膜(parietal-peritoneum)或腹壁薄層;覆蓋腹、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜(visceral-peritoneum)腹膜或腹膜臟層。臟腹膜與壁腹膜互相延續(xù)、移行,共同圍成不規(guī)則的潛在性腔隙,稱為腹膜腔(peritoneal-cavity)。腹膜腔是臟、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙。腹膜腔內(nèi)有少量漿液,在臟器活動時可減少摩擦。腹膜間皮細胞屬于上皮組織中的單層扁平上皮,是覆蓋于腹膜表面的一層細胞。間皮細胞是構成間皮的細胞,正常大小約為15-25微米,細胞常呈圓形或者卵圓形。其功用是提供潤滑,使器官與器官、器官與胸膜與腹膜間都能得到良好的保護,不會互相磨損受傷。而間皮所的潤滑和保護作用就是靠間皮細胞所分泌的物質(zhì)來達成,分泌物多半為細胞外基質(zhì)、玻尿酸類物質(zhì)。

5.方法簡介:

實驗室分離的小鼠腹膜間皮細胞采用混合膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的小鼠腹膜間皮細胞經(jīng)PCK、Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件鼠尾膠原2-5μg/cm2

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

產(chǎn)品貨號CM-M170

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)成纖維細胞樣

傳代特性可傳3代左右

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

 

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 CXCL10 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽

 NMU 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽

 FAP 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

 glypican 4 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽

 GPC1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽

 Syndecan-2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽

 LIGHT / TNFSF14 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽

小鼠 RIPK3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

小鼠 CYR61 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽

 INHBA 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽

小鼠腹膜間皮細胞己二酸二甲酯 CP,98%正戊酰氯 98%IL-17  大鼠白介素-17

己二酸二甲酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)2--5-硝基二苯酮 98%IL-18  大鼠白介素-18

1,10-癸二 98%4-烯氧基-2-羥基二苯甲酮 99%IL-19  大鼠白介素-19

甲基烯酸縮水甘油酯 98%二 99%IL-20  大鼠白介素-20

正己 99%二苯甲酮腙 98%IL-21  大鼠白介素-21

1,6-己二 98%2-甲基氨-5-氯二苯甲酮  99%IL-22  大鼠白介素-22

3-甲氧基苯乙酮 98%2-氯-5-硝基二苯甲酮  98%IL-23  大鼠白介素-23

1,8-辛二 98%二苯 99%rat adiponectin  大鼠脂聯(lián)素

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