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詳細介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| SH-SY5Y [SHSY-5Y] (神經(jīng)母細胞瘤細胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0207 |
商品介紹：
名稱 SH-SY5Y [SHSY-5Y] (神經(jīng)母細胞瘤細胞) 別稱SHSY5Y; SHSY-5Y; SH-Sy5y; SK-SH-SY5Y; SY5Y 種屬人類 年齡（性別）女性，4歲 組織來源腦神經(jīng)母細胞瘤，轉(zhuǎn)移部位骨髓 生長特性半貼半懸 細胞形態(tài)上皮細胞樣 背景描述SH-SY5Y細胞是于1970年建自骨瘤轉(zhuǎn)移灶的神經(jīng)母細胞瘤SK-N-SH細胞系經(jīng)3次克隆后的亞系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。SH-SY5Y細胞顯示中等水平的多巴胺-β-羥基酶活性，SH-SY5Y細胞的飽和密度大于1×10^6/cm^2。 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基MEM/F12＋15% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~48-72小時 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 抗原表達情況Blood Type A; Rh+ 注意事項1、該細胞容易聚團，傳代第二天輕微聚團甚至漂浮為正?，F(xiàn)象，無需換液繼續(xù)培養(yǎng)2~3天后細胞可正常貼壁； 2、細胞聚團嚴重影響細胞生長后，可用胰酶消化細胞使之重新分散，傳代后少動少換液，聚團會有改善。 |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
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SH-SY5Y [SHSY-5Y] (神經(jīng)母細胞瘤細胞) (腦)心浸液瓊脂 Brain Heart Infusion Broth 250g
1g 鄰聯(lián)茴香胺 O-Dianisidine Dihydrochloride 4℃保存
50T 大米CrylAc基因PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
2 ug pCMV-SPORT6 GTF3C3 pCMV-SPORT6 GTF3C3 低溫運輸，-20℃保存
50T 豬托克特諾病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
200次 熒光染色細胞凋亡檢測試劑盒 Fluorescent Staining Apoptosis Detection Kit 4℃避光保存
25mL IEF Sample Buffer,2X,pH 3-10 IEF Sample Buffer,2X,pH 3-10 常溫保存
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