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H4 (腦神經(jīng)膠質瘤細胞)

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更新時間:2025-02-19 09:52:44瀏覽次數(shù):346

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X0087 應用領域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
H4 (腦神經(jīng)膠質瘤細胞)的相關*:DENND2A DENND2A蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
FOXL2 小瞼裂綜合征蛋白BPES抗體 規(guī)格: 0.1ml
ECHS1 烯脂酰A水解抗體 規(guī)格: 0.1ml
ASF1A 細胞衰老相關蛋白ASF1A抗體 規(guī)格: 0.1ml
Goat Anti-Mouse IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的羊抗

詳細介紹

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

產(chǎn)品屬性:  

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

H4 (腦神經(jīng)膠質瘤細胞)

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0087

商品介紹:

名稱    H4 (腦神經(jīng)膠質瘤細胞)  

別稱H-4

年齡(性別)37

組織來源腦組織

生長特性貼壁細胞

細胞形態(tài)上皮細胞樣

背景描述H4細胞建系于1973年;它衍生于一個患神經(jīng)膠質瘤的37歲病人的腦組織。H4細胞的致瘤特性己經(jīng)被屏蔽,細胞接種動物一般不產(chǎn)生腫瘤結節(jié)。H4細胞具有修復MNNG損傷5型腺病毒的能力。

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基DMEM10% FBS1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3/

凍存條件

凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO25%

溫度:37℃

致瘤性No, in immunosuppressed mice. Yes, in semisolid medium.

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

Ephrin-B2(EFNB2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白5(IGFBP-5)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

大鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

豬肺表面活性物質相關蛋白B(SP-B)免疫試劑盒進口、分裝

大鼠血栓前體蛋白(TpP)免疫試劑盒*直銷

CCAAT增強子結合蛋白δ(C/EBPδ)免疫試劑盒*直銷

X受體α(LXRα)免疫試劑盒*直銷

EB病毒核抗原3A抗體(IgG)免疫試劑盒進口、分裝

巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫試劑盒進口、組裝

小鼠巨噬細胞移動抑制因子(MIF)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

H4 (腦神經(jīng)膠質瘤細胞)2 ug pET-43.1a(+) pET-43.1a(+) 低溫運輸,-20℃保存

金氏B培養(yǎng)基 King’s B medium 250g

1瓶 A549細胞株 A549 低溫運輸和保存

1套 玻璃勻漿器,10 mL Glass Homogenizer 常溫保存

150次 天凈沙DNA甲基化修飾試劑盒 Embedded Bisulfite Modification Kit ,常溫保存,蛋白K需要-20℃保存。

100mL MOPS Buffer,0.5M,pH8.0   MOPS Buffer,0.5M,pH8.0   常溫保存

100uL 氨芐抗性基因PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存

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