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上海谷研實業(yè)有限公司
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乙醇脫氫酶1抗體

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產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2023-03-27 14:04:39瀏覽次數:221次

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供貨周期 現貨 規(guī)格 50ul 100ul 200ul
應用領域 化工,生物產業(yè) 主要用途 產品僅供科研
英文名稱 ADH1A 抗體來源 Rabbit
抗體類型 Polyclonal 交叉反應 Human
亞型 IgG 保存條件 Shippedat4℃.Storeat-20°C
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商品屬性:

產品名稱

規(guī)格

產品分類

抗體來源

乙醇脫氫酶1抗體

50ul、100ul、200ul

抗體 / 一抗

Rabbit

 

規(guī)格 50ul 100ul 200ul

產品分類 抗體 / 一抗

英文名稱 ADH1A

英文別名 ADH1A_HUMAN; EC:1.1.1.1; Alcohol dehydroase 1A; ADH1; Alcohol dehydroase subunit alpha;

交叉反應 Human

標記 Unconjugated

抗體來源:Rabbit

抗體類型:Polyclonal

免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human ADH1A

蛋白細胞定位:細胞漿

純化方法:affinity purified by Protein A

亞型:IgG

性狀:Liquid

濃度:1mg/ml

儲存液:0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存條件:Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

背景資料

ADH (Alcohol dehydroase) consists of a dimer of identical or nonidentical chains of three types; alpha, beta and gamma. Members of this enzyme family metabolize a wide variety of substrates, including ethanol, retinol, other aliphatic alcohols, hydroxysteroids, and lipid peroxidation products. There are 7 different ADH's isozymes in human: three belongs to class I: alpha, beta, and gamma, one to class II: pi, one to class III: chi, one to class IV: ADH7 and one to class V: ADH6.

 

抗體制備過程:

1.材料與試劑

a.提取的動物 Ig

b.弗氏佐劑和弗氏不佐劑

d.實驗動物 兔

e.其它材料及試劑

2、選擇實驗活體。

3、進行動物免疫實驗。

4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。

5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。

6、純化出抗體。

7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)

2.png

免疫熒光技術的實驗步驟:

一、準備好試劑與儀器:

磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。

二、實驗步驟

1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。

2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間以三十分鐘為參考。

3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。

4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。

5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。

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抗體分子標記技術:

(一)原理

當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為殘基,殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。

(二)準備

1.試劑

經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;

(三)操作要點

1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;

2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;

4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;

6.碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。

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