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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3B(DNMT3B)真核蛋白人

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-22 10:21:09瀏覽次數(shù):167次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D3058 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Eukaryotic DNA Methyltransferase 3B (DNMT3B)
物種 Homo sapiens (Human,人)
DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3B(DNMT3B)真核蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗體 英文名稱:GMEB1 0.2ml糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白2抗體 英文名稱:GMEB2 0.2ml轉(zhuǎn)移酶GMPS抗體 英文名稱:GMP Synthase 0.2ml

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

Recombinant Rho Family GTPase 1 (RND1)產(chǎn)品名稱:Rho家族GTP酶1(RND1)重組蛋白物種:Human,人ARHS; RHO6; RHOS; Ras Homolog Gene Family Member S; Rho-related GTP-binding protein Rho6

Recombinant Sulfatase 1 (SULF1)產(chǎn)品名稱:酯酶1(SULF1)重組蛋白物種:Human,人HSULF-1; Extracellular sulfatase Sulf-1

Recombinant oisomerase II (2)產(chǎn)品名稱:拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(2)重組蛋白物種:Rat,大鼠DNA oisomerase 2-alpha; DNA oisomerase II, alpha isozyme

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3B(DNMT3B)真核蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D3058

 

 

英文名稱:Eukaryotic DNA Methyltransferase 3B (DNMT3B)

ICF; M.HsaIIIB; DNA methyltransferase HsaIIIB

型號(hào):GOY-01D3058

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:真核表達(dá)

宿主293F cell

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞核

預(yù)測分子量:24.7kDa

實(shí)際分子量:30/33kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Ser145~Pro355 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點(diǎn):7.0

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

圖片3.png
蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

K-562(人慢性骨髓性白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

異蓮心堿;Isoliensinine 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

 Hela, 人宮頸細(xì)胞系

原堿;proine 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

 CFPAC-1(人胰腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

野鷲尾苷;Lridin 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

 中性(含100mL酶解緩沖液)10mL

異甜菊 ;isosteviol 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

 小鼠甲狀腺上細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

芫花素;Genkwanin 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

 5637(人膀胱細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

3-乙酰基乳香 ;alpha-bosw 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

 人椎間盤髓核細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

銀鍛苷;Tiliroside 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

 馬血清/Horse serumBR200毫升國產(chǎn)/進(jìn)口

;Indaconitone 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3B(DNMT3B)真核蛋白人小鼠血小板衍生生長因子AA(PDGF-AA)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

猴子白介素15(IL-15)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

1.5mL 核酸清除劑 Nucleic Acid Erasol -20℃保存

1瓶 PIEC細(xì)胞株 PIEC 低溫運(yùn)輸和保存

人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)免疫試劑盒

培養(yǎng)基(蛋白胨水) Indole Medium 10g

2 ug pMA09-H pMA09-H 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

人一氧化碳血紅蛋白(HbCO)免疫試劑盒

250mL Sodium Carbonate Bicarbonate,0.5M,pH9.0   Sodium Carbonate Bicarbonate,0.5M,pH9.0   常溫保存

大鼠游離甲狀腺素(FT4)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

2 ug pGC-Ctr pGC-Ctr 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

 


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