蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Carnosine Dipeptidase 2 (CNDP2)

PEPA; CN2; CPGL; Peptidase A; Cytosolic Nonspecific Dipeptidase; Metallopeptidase M20 Family; Glutamate carboxypeptidase-like protein 1

型號(hào)：GOY-01D2588

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量：24.9kDa

實(shí)際分子量：25kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Glu285~Asn475 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：9.1

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

基質(zhì)金屬11(MMP11)重組蛋白英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 11 (MMP11)SL3; ST3; STMY3; Stromelysin 3物種：Mouse，小鼠

脲酰丙酸酶β(UPB1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Beta-ureidopropionase (UPB1)UP-B1; BUP1; Beta-alanine synthase; Ureidopropionase Beta; N-carbamoyl-beta-alanine amidohydrolase物種：Mouse，小鼠

蛋白二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)活性蛋白英文名稱：Active Protein Disulfide Isomerase (PDI)P4HB; ERBA2L; PDIA1; PO4DB; PROHB, DSI, GIT, PDI, PO4HB, P4Hbeta; Prolyl 4-Hydroxylase Subunit Beta; Procollagen-Proline 2-Oxoglutarate 4-Dioxygenase Beta Polypeptide物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

香菇 Lentinula edodes凍膠假絲酵母 Candida gelida

硫堇(>90%,BS) 質(zhì)量規(guī)格：>90%,BS Thionin

 BEL-7404(人肝細(xì)胞)普通變形桿菌 Proteus vulgaris

硫代水楊(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Thiosalicylic acid

 根瘤菌酒假絲酵母 Candida kefyr

吐啉(>90%,Ind Grade) 質(zhì)量規(guī)格：>90%,Ind Grade Thorin

 谷氨棒桿菌 Corynebacterium glutamicumE.G7-OVA(小鼠T淋巴瘤細(xì)胞)

硫鏈絲菌素 質(zhì)量規(guī)格：>90%,進(jìn)分 Thiostrepton from Streptomyces azureus

 SP Rabbit HRP Kit/兔Streptavidin-HRP試劑盒豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum

胸腺(>99%,BR) 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR Thymine

 釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeMKN-28(人胃高轉(zhuǎn)移細(xì)胞)

特泯菌 質(zhì)量規(guī)格：BC Timentin

 香菇 Lentinula edodes地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

草亞錫(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Tin (II) oxalate

 人胎盤絨毛膜細(xì)胞培養(yǎng)基杜鵑盤多毛孢霉 Pestalotia rhododendri

二氧化錫(> 99%,BR) 質(zhì)量規(guī)格：> 99%,BR Tin (IV) oxide

肌肽酶2(CNDP2)重組蛋白小鼠2 ug pET-24b(+) pET-24b(+) 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

1 管 Stbl4大腸桿菌 Stbl4 E.coli Strain -80℃保存

100µL 小鼠抗V5標(biāo)簽單抗 Anti V5-Tag Mouse MAb -20℃保存

1瓶 MEG-01細(xì)胞株 MEG-01 低溫運(yùn)輸和保存

大鼠細(xì)胞色素P4502E1(CYP2E1)免疫試劑盒

人亮氨基肽3(LAP3)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

TPY液體培養(yǎng)基 TPY Fliud Medium 250g

人3-葡萄糖苷酸孕二醇(PdG)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

2 ug pENTR3C pENTR3C 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

O/F培養(yǎng)基(HLGB) O/F Medium 250g

mTSB肉湯 mTSB Broth With Novobiocin 250g