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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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大鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法

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品       牌R&D/美國(guó)

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2017-03-24 08:23:12瀏覽次數(shù):362次

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用途:本試劑盒僅供科研使用,定量檢測(cè)細(xì)胞液、體液、組織、血清、血漿等標(biāo)本大鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法的含量。

大鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱(chēng):Rat Cyclin-D3 ELISA Kit      檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買(mǎi)本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。 
英文名稱(chēng): Rat Cyclin-D3 ELISA Kit  
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測(cè)定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,不得用于臨床診斷。
標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚(yú)等。
大鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
大鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過(guò)反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測(cè)。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè)。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱(chēng)取重量0.5mg,加入500ul PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測(cè),應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
大鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(個(gè)濃度)、空白孔、待測(cè)樣品組。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿(mǎn)每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A  50ul 后,再加入顯色劑 B  50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長(zhǎng)讀取各孔的 OD 值。 
注意事項(xiàng):
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過(guò)大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)?jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對(duì)本試劑盒有任何疑問(wèn),可和所購(gòu)經(jīng)銷(xiāo)商, 如果因運(yùn)輸過(guò)程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
大鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑AB和終止液。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

Phospho-Beta-Catenin (Ser552)  磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體  規(guī)格:   0.1ml

PRDM1/Blimp1  B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)成熟蛋白1抗體   規(guī)格:   0.2ml

ABI3BP  ABI基因家族成員3結(jié)合蛋白抗體   規(guī)格:   0.2ml

CHX10  CHX10蛋白抗體    規(guī)格:   0.1ml

FOXC1/FREAC3  叉相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子3抗體  規(guī)格:   0.1ml

Ezrin  埃茲蛋白抗體 規(guī)格:   0.1ml

phospho-FADD(Ser194)  磷酸化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體  規(guī)格:   0.1ml

phospho-FANCD2(Ser222)  磷酸化FANCD2抗體   規(guī)格:   0.1ml

Phospho-FoxO1 (Ser256)  磷酸化叉蛋白家族1抗體  規(guī)格:   0.1ml

Donkey Anti-human IgG/Gold  膠體金標(biāo)記的驢抗人IgG   規(guī)格:   0.5ml

LRPAP1/MRAP  脂蛋白受體相關(guān)蛋白抗體(低密度脂蛋白相關(guān)蛋白的相關(guān)蛋白1)  規(guī)格:   0.1ml

MTUS1/Angiotensin II Type 2 Receptor  管緊張素Ⅱ2型受體相互作用蛋白抗體 規(guī)格:   0.1ml

phospho-LSP1 (Ser204)  磷酸化白細(xì)胞F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體   規(guī)格:   0.1ml

THRA1+2  甲狀激素受體α1+α2抗體    規(guī)格:   0.2ml

DACH2  轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子DACH2抗體   規(guī)格:   0.2ml

OSGIN1  氧化應(yīng)激誘導(dǎo)生抑制因子1抗體    規(guī)格:   0.2ml

Mouse Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG    規(guī)格:   0.1ml

phospho-EGFR (Tyr1092)  磷酸化表皮生因子受體抗體    規(guī)格:   0.1ml

Insulin Receptor R  胰島素受體相關(guān)受體抗體  規(guī)格:   0.2ml

phospho-PI3K/PIK3CD(Tyr524)  磷酸化磷脂酰肌醇激酶催化亞單位D抗體   規(guī)格:   0.1ml

Alpha s2 Casein  α-s2酪蛋白抗體    規(guī)格:   0.2ml

Phospho-TIF1 beta(Ser824)  磷酸化轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β抗體 規(guī)格:   0.1ml

Phospho-HP1 gamma (Ser93)  磷酸化染色質(zhì)相關(guān)蛋白1-γ抗體 規(guī)格:   0.1ml

H3-K4-HMTase SETD7  組蛋白H4-K4甲基轉(zhuǎn)移酶抗體  規(guī)格:   0.2ml (S)-3-羥基四氫呋喃英文名(EN):(S)-3-Hydroxytetrahydrofuran,99%CAS No.:86087-23-2規(guī)格(SP):1G類(lèi)別(Key):通用試劑

3-羥基四氫呋喃英文名(EN):3-Hydroxytetrahydrofuran,98%CAS No.:453-20-3規(guī)格(SP):5G類(lèi)別(Key):通用試劑

2,3-二氫-5-醛基-1-...英文名(EN):5-Coumarancarboxaldehyde,97%CAS No.:55745-70-5規(guī)格(SP):1G類(lèi)別(Key):通用試劑

2-戊基呋喃英文名(EN):2-Pentylfuran,≥97%CAS No.:3777-69-3規(guī)格(SP):10G類(lèi)別(Key):通用試劑

2--3-硫基呋喃英文名(EN):2-Methyl-3-(methylthio)furan,≥98%CAS No.:63012-97-5規(guī)格(SP):5G類(lèi)別(Key):通用試劑

2--3-呋喃硫醇英文名(EN):2-Methyl-3-furanthiol,95%CAS No.:28588-74-1規(guī)格(SP):250MG類(lèi)別(Key):通用試劑

2-羥-3,4-二氫...英文名(EN):3,4-Dihydro-2H-pyran-2-methanol,≥98.5%CAS No.:3749-36-8規(guī)格(SP):1ML類(lèi)別(Key):通用試劑

2,5-二氫呋喃英文名(EN):2,5-Dihydrofuran,97%CAS No.:1708-29-8規(guī)格(SP):25G類(lèi)別(Key):通用試劑

苯并呋喃英文名(EN):2,3-Benzofuran,99%CAS No.:271-89-6規(guī)格(SP):5G類(lèi)別(Key):通用試劑

2,3-二氫呋喃英文名(EN):2,3-Dihydrofuran,99%CAS No.:1191-99-7規(guī)格(SP):25ML類(lèi)別(Key):通用試劑

大鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法3,4-二氫-2H-吡喃英文名(EN):3,4-Dihydro-2H-pyran,97%CAS No.:110-87-2規(guī)格(SP):100ML類(lèi)別(Key):通用試劑

2,5-二呋喃英文名(EN):2,5-Dimethylfuran,99%CAS No.:625-86-5規(guī)格(SP):25ML類(lèi)別(Key):通用試劑

2,5-二氧基四氫呋喃英文名(EN):2,5-Dimethoxytetrahydrofuran,98%CAS No.:696-59-3規(guī)格(SP):25G類(lèi)別(Key):通用試劑

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