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產(chǎn)品型號(hào)
品 牌ATCC
廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2017-01-23 10:33:08瀏覽次數(shù):343次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)昆蟲(chóng)卵巢細(xì)胞;Sf21說(shuō)明書(shū)
秋行軍蟲(chóng)卵巢細(xì)胞Sf9克隆株;SSf-aSuper Spodopter
蚊子幼蟲(chóng)體細(xì)胞;Aedes albopictus clone C6/3
大耳山羊腎細(xì)胞;LDG-2價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買(mǎi)到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
大耳山羊腎細(xì)胞;LDG-2價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱(chēng)
形態(tài)特性 上皮樣,多角形
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一雄性大耳山羊的腎組織。1990年由中國(guó)科學(xué)院昆明細(xì)胞庫(kù)建立。
培養(yǎng)條件 M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
500mL L-15 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 +10% 小牛血清 )
100mL DNA Tris HCl,1M,pH6.5
雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Annexin V-FITC·PI) 81025-25 25 次
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)pBR322/MspI 90602B-50 50 次
5mg 生物素化兔 IgG
50mL 丁基硫介質(zhì)
5mg 5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚葡萄糖苷
200U Klenow 片段
卵磷脂 ( 蛋黃 ) CAS8002-43-5 10g
胰蛋白酶抑制劑,10mg/mL 100834-10 10mL
30 次 柱式腐殖酸清除劑
1mg MM1-43(FM®1-43)
10μL AP 標(biāo)記的抗地高抗體
400U RNase 抑制劑 ( 人源 )
5次 天凈沙非同位素探針雜交試劑盒
T4 聚核苷酸激酶 120506-200 200U
AMV cDNA *鏈合成試劑盒 130608-30 30 次
100U Vent DNA 聚合酶
1mL 鮭魚(yú)精 DNA 溶液
10g 馬來(lái)酸
10μL AP 標(biāo)記的抗生物素抗體
3,5 二硝基水楊酸 CAS609-99-4 25gM17瓊脂/M17 Agar 牛奶和制品中酸菌檢測(cè)和分離培養(yǎng) 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 250克
人脈絡(luò)膜血管細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
腸道菌計(jì)數(shù)瓊脂/結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡聚糖瓊脂/VRBDA 腸道菌計(jì)數(shù)和腸桿菌科鑒別 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 250克
人鼻咽母系細(xì)胞 英文名稱(chēng): CNE-2Z
抗生素Ⅷ號(hào)培養(yǎng)基/抗生素8號(hào)培養(yǎng)基/Antibiotic Agar NO.8 去甲萬(wàn)古霉素的效價(jià)測(cè)定 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 250克
大鼠腎小管上細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
去氧膽酸鹽瓊脂/脫氧膽酸鈉瓊脂/DCLA 大腸菌群的平板測(cè)定以及腸道菌的選擇性培養(yǎng) 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 250克
Western Blot封閉液Ⅱ(奶粉,pH7.5)/Blocking Buffer(milk) 100ml、500ml 100ml、500ml
胰蛋白胨膽鹽瓊脂/Tryptone Bile Agar 大腸桿菌的膜過(guò)濾法選擇性培養(yǎng) 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 250克
S180/小鼠腹水瘤 株 國(guó)產(chǎn)
KP-N-NS(人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移)) 5×106cells/瓶×2
NCI-H520(人肺鱗細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 gersion
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