人慢性髓系白血病細胞；K562圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人慢性髓系白血病細胞；K562圖片
形態(tài)特性  淋巴母細胞樣；圓形
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細胞系由Lozzio and Lozzio 于1975年從一名53歲慢性髓系白血病女性患者的胸水中分離建立。此細胞株被廣泛用于自然殺傷方面的研究。K-562母細胞是一種具多能性的造血系統(tǒng)的惡性腫瘤細胞，能自發(fā)分化成可識別的紅系、粒系和單核系的祖細胞；表達CD7。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)   15%NBS
傳代方法  1：3傳代；3-5天一次
傳代情況 PN12
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR  Amelogenin：X；D8S1179：12；D21S11：29， 31；D7S820：9，11；CSF1PO：9，10；D3S1358：16；TH01：9.3；D13S317：8；D16S539：11，12；D2S1338：17；D19S433：14,14.2；vWA：16；THOX：8, 9；D18S51：15,16；D5S818：11,12；FGA：21, 24。
同工酶 
染色體  59-68
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

雜交袋20 個
鏈霉親和素，AP 標記0.5mL
1000 μL RNase-free 藍吸頭 ( 盒裝 )100 支
5-Fluorouracil(5- 氟脲嘧啶 )1mL
UTP 溶液，100mM0.25mL
18-0690-100脂質(zhì)氧化 (MDA) 檢測試劑盒100 次
130905-10超雜交液 ( 芯片 )10mL
TE 緩沖液，PH8.010mL
非凍型血液 DNA 保存液100mL
多聚 -L- 賴氨酸 (15-30 萬 )25mg
魚類種屬鑒定 PCR Mix100 次
CAS25988-63-0多聚 -L- 賴氨酸 (7-15 萬 )25mg
130528-1植物蛋白酶抑制劑1mL
柱式動物線粒體 DNAout，測序15 次
冷凍型血液 RNA 保存液100mL
聚乙烯醇100g
微量 RNA 定量試劑盒1mL
CAS77-86-1三 ( 羥甲基 ) 氨基甲烷100g兔抗腦組織抗體(ABAb)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人總膽固醇（TC）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人載脂蛋白A4（apo-A4）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人胰蛋白酶原Ⅱ(Try-Ⅱ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人纖溶酶原(Plg)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人脫氫表雄酮(DHEA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人輸血傳播毒/辛型肝炎毒((TTV)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人乳腺易感蛋白1(BRCA-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人破傷風(fēng)抗體(Tetanus Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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人鏈激酶(SK)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗中性粒細胞胞漿抗體(cANCA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原抗體(RANA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗IVIgG抗體ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人甲種胎兒球蛋白/人甲胎蛋白(AFP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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人肝細胞生長因子受體(HGFR/ c-MET)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人多巴色素異構(gòu)酶(DT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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