人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；HCT 116圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；HCT 116圖片
形態(tài)特性  上皮
生長特性 貼壁生長
特征特性  HCT116是1979年M.Brattain等從患結(jié)腸癌的男性病人中分離的三株惡性細(xì)胞之一。 在半固體瓊脂糖培養(yǎng)基中形成克隆。 HCT116在無胸腺的裸鼠有致瘤性，形成上皮樣的腫瘤。 
培養(yǎng)條件  McCoy's 5A Media (Modified with Tricine)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法  消化5-10分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(9+5)
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR  Amelogenin:X,Y；CSF1PO:7,10；D13S317:10,12；D16S539:11,13；D18S51:17；D19S433:12,13；D21S11:29,30；D2S1338:16；D3S1358:12,17,18,19；D5S818:10,11；D7S820:11,12；D8S1179:11,12,14；FGA:18,23；TH01:8,9；TPOX:8,9；vWA:17,22
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

CAS65546-95-4丙烯葡聚糖凝膠 S-500 HR150mL
130559-10Rosetta-gami(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10
100812-100BLOTTO 溶液100mL
硝酸銀25g
脂肪酶5g
柱式植物葉綠體 DNAout15 次
70905-1.5明膠溶液，2%，PCR 1.5mL
堿性磷酸酶，偶聯(lián)500U
色素細(xì)胞生長因子 - 不含 TPA5mL
IMDM 培養(yǎng)基 ( 含 1% 雙抗 )500mL
Vent DNA 聚合酶100U
60209-10鹽酸四環(huán)素溶液 ,50mg/mL10mL七葉苷培養(yǎng)基/Esculin Medium生化實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基，用于細(xì)菌七葉苷水解試驗(yàn)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
MDA-MB-468(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠腺腫瘤細(xì)胞英文名稱：C127
人慢性骨髓性白血病細(xì)胞英文名稱：K562
成纖維細(xì)胞英文名稱：3T3
ME-180(人子宮頸表細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
AsPC-1(人胰腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
布氏肉湯/Brucella Broth用于彎曲桿菌增菌肉湯和布氏瓊脂的制備250克國產(chǎn)/進(jìn)口
血清消化粉/Serum powderBR250克國產(chǎn)/進(jìn)口
MRC-5(人胚肺成纖維細(xì)胞 )5×106cells/瓶×2
小鼠表黑色素細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞英文名稱：MEG-01
SMC-1(人胸膜瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HO-8910PM(人高轉(zhuǎn)移卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
PBS(10X)規(guī)格：500ml
精氨酸脫羧酶對照發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口
NCI-H520(人肺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
BRL-3A(大鼠正常肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞英文名稱：JeKo-1
大鼠小鼠雜合神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞英文名稱：NG108-15
NCTC 1469(小鼠正常肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MN-c, 小鼠質(zhì)神經(jīng)元gersion
萘酚 AS-TR 磷酸鹽25mg
凝固血液 DNAout30 次
CAS1398-61-4幾丁質(zhì)10g
柱式無內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNAout50 次
小鼠抗 HA 標(biāo)簽單抗1000μL
神經(jīng)元生長因子5mL
四氧嘧啶5g
CAS110-15-6琥珀酸 ( 丁二酸 )25g