人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞；WPMY-1圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞；WPMY-1圖片
形態(tài)特性  成肌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  肌成纖維基質(zhì)細(xì)胞株, WPMY-1, 與RWPE-1 cells (ATCC CRL-11609)一樣，來源于同一張成人前列腺組織切片的周圍區(qū)域的基質(zhì)細(xì)胞。 通過一個(gè)pRSTV質(zhì)料結(jié)構(gòu)，用SV40大T抗原對(duì)基質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行永生化。 WPMY-1細(xì)胞，與RWPE-1細(xì)胞及其它上皮細(xì)胞衍生株一樣，屬于來源于同一個(gè)前列腺的一系列細(xì)胞株。 由于它們來源于同一個(gè)前列腺的周圍區(qū)域，WPMY-1細(xì)胞株對(duì)于研究分泌和基質(zhì)與上皮細(xì)胞相互作用尤其有用。 據(jù)提供者報(bào)道，來源于同一個(gè)前列腺的RWPE-1細(xì)胞株(ATCC CRL-1 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，5%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 P(41+5)
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

微型離心管研磨杵 ( 有離心管 )     50 套
維生素 B1    10g
維生素 B12    1g
維生素 B6    5g
維生素 C 測(cè)試盒    48 T
維生素 D3    1g
維生素 E    5g
胃蛋白酶    250mg
胃蛋白酶 1:10000    10g
胃蛋白酶 1:3000    5g
胃蛋白酶測(cè)試盒    24 T
胃蛋白酶抑制劑    5mg
胃蛋白酶抑制劑溶液，1 mg/mL    1mL
胃粘膜素    100mg
蝸牛酶干粉    5g
無 RNase 的 DNase 溶液 ,1U/μL    300U
無包被磁珠    2mL
無機(jī)焦磷酸酶 ( 酵母 )    10U
無機(jī)焦磷酸酶，熱穩(wěn)定    250U
無脊椎動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix    100 次
19（R）-hydroxy Prostaglandin F2α （50 ug）9α，11α，15S，19R-tetrahydroxy-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid； 19
Cell-Based Assay Buffer （10X） （50 ml）Cell-Based Assay Buffer （10X）
Laemmli Buffer Stock Solution （2X） （25 mL）Laemmli Buffer Stock Solution （2X）
Dihomo-γ-Linolenoyl PAF C-16 （10 mg）1-O-hexadecyl-2-O-（8Z，11Z，14Z-eicosatrienoyl）-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine； 1-O-hexadecyl-2-dihomo-γ-Linolenoyl-sn-glycero-3-Phosphocholine； Dihomo-γ-Linolenoyl PAF C-16
2-Arachidonoyl Glycerol （10 mg）5Z，8Z，11Z，14Z-eicosatetraenoic acid， 2-glyceryl ester； 2-AG； 2-Arachidonoyl Glycerol
1-Oleoyl-2-acetyl-sn-glycerol （100 mg）1-O-9Z-octadecenoyl-2-O-acetyl-sn-glycerol； OAG； 1-Oleoyl-2-acetyl-sn-glycerol
Xestospongin C （1 mg）[1R-（1R，4aR，11R，12aS，13S，16aS，23R，24aS）]-eicosahydro-5H，17H-1，23:11，13-diethano-2H，14H-[1，11]dioxacycloeicosino[2，3-b:12，13-b1]dipyridine； XeC|Araguspongine E； Xestospongin C
G6PDH Enzyme Mixture （1 ea）G6PDH Enzyme Mixture
SPHK Assay Cofactor Mixture （1 ea）SPHK Cofactor Mixture； SPHK Assay Cofactor Mixture
β-HB Developing Enzyme （1 ea）β-HB Developing Enzyme
Sesamin （1 mg）[1S-（1α，3aα，4α，6aα）]-5，5’-（tetrahydro-1H，3H-furo[3，4-c]furan-1，4-diyl）bis-1，3-benzodioxole； Sesamin
無內(nèi)毒素槍頭，1 mL    1盒
無內(nèi)毒素槍頭，200 μL    1盒
無內(nèi)毒素水    50mL
無內(nèi)毒素螢火蟲熒光素    25mg