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上海申知心生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： 高血脂癥動物模型,心血管疾病動物模型,缺血性心臟病動物模型 |
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2019-2-22 閱讀(2219)
(1)復(fù)制方法 健康雄性大鼠，體重為250～300g。以水合氯醛(按350～400mg/kg體重的劑量)(按50～60mg/kg體重的劑量)經(jīng)腹腔注射麻醉后，固定在立體定位儀上。剪去頭頂部毛發(fā)，手術(shù)區(qū)域皮膚消毒。無菌條件下沿正中線將皮膚切開1cm，按大鼠立體定位圖譜標(biāo)好杏仁核立體坐標(biāo)位置(坐標(biāo)定位：AP2mm，ML2mm， DVR8.5mm)。用小型牙鉆鉆透骨面，將長度為8.5mm的杏仁核刺激電極徐徐插入杏仁核。同時在顱骨正中線左右各旁開4mm，前后各10mm處安放4個皮質(zhì)電波記錄電極，插入深度為2mm，用牙托粉將電極固定。為防止電極脫落，可在枕骨和額骨安放2～3個小螺絲釘，并以牙托粉固定。術(shù)后肌肉注射卡那霉素(每只125mg/d)或慶大霉素(每只2萬 U/d)，連續(xù)3d，以防感染。1周后可用于實(shí)驗(yàn)。
每天在固定的時間給予大鼠電刺激一次，每次刺激3s。刺激強(qiáng)度從80μA開始，以后每日增加80μA，直至引起刺激部位的后放電，此時電流即為后放電電流。如果反復(fù)刺激始終不能誘發(fā)后放電的大鼠，終也不能形成點(diǎn)燃效應(yīng)。因此，需選擇測出后放電電流的大鼠用于實(shí)驗(yàn)。
(2)模型特點(diǎn) 點(diǎn)燃是通過在腦內(nèi)某特定局部反復(fù)亞抽搐劑量電刺激，終導(dǎo)致強(qiáng)烈的部分或全身性癲癎發(fā)作。邊緣系統(tǒng)是常用的電刺激部位。點(diǎn)燃一旦形成，可以維持很長時間甚至終身。該模型具有以下特點(diǎn)：①即使不再給以電刺激，皮質(zhì)電波的規(guī)律性、發(fā)作癲癎樣放電可維持一年以上。②再次電刺激又可以引起陣攣性發(fā)作。③少數(shù)動物可以自然發(fā)作。④發(fā)作是通過突觸間傳遞引起的。目前認(rèn)為點(diǎn)燃模型可能是由于反復(fù)電刺激引起內(nèi)源性谷氨酸釋放增多，并使NMDA——受體敏感化以及使其數(shù)目增加的結(jié)果。點(diǎn)燃效應(yīng)可在多種動物形成，但常用大鼠。刺激部位以杏仁核敏感，其次是蒼白球、海馬和梨狀區(qū)。但紅核、黑質(zhì)、腦干的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)等部位不敏感。電刺激的標(biāo)準(zhǔn)條件為電流波長1ms、頻率60Hz、持續(xù)1ms。其中頻率為25、60、150Hz的點(diǎn)燃作用相同。刺激強(qiáng)度：以杏仁核為例，大鼠為50～400μA，貓為100～1000μA，猴和狒狒為200～600μA。
(3)比較醫(yī)學(xué) 點(diǎn)燃模型是目前*的一種更為接近人類、應(yīng)用廣泛的復(fù)雜部分性發(fā)作模型。據(jù)文獻(xiàn)資料，許多動物可作為點(diǎn)燃模型，如青蛙、爬蟲類、小鼠、大鼠、兔子、狗、貓、恒河猴以及狒狒等。杏仁核以及其他邊緣系統(tǒng)的點(diǎn)燃模型的癇性發(fā)作通常經(jīng)歷五個階段：1級，面部陣攣；2級。面部陣攣伴節(jié)律點(diǎn)頭；3級。面部陣攣、點(diǎn)頭、單肢陣攣；4級，3級+后肢站立；5級，4級＋跌倒。4級和5級可作為繼發(fā)性全身性癲癎模型。點(diǎn)燃一旦建立，這種腦細(xì)胞及驚厥行為的敏感性可長期維持及至動物終身，這便于探討癲癎研究中的神經(jīng)元高度興奮形成機(jī)制以及高度興奮的保持和發(fā)展。同時該模型還有建立方便、成本較低的優(yōu)點(diǎn)，在篩選新的抗癲癎藥物及測試其副作用方面比正常動物及其他一些模型更具敏感性和實(shí)用性。
