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差分拉曼光譜技術(shù)背景介紹

近年來，拉曼光譜技術(shù)在食品檢測、生物醫(yī)藥、分子結(jié)構(gòu)研究、化工過程、生物化學(xué)、考古及文物鑒定、法學(xué)樣品分析等各行各業(yè)得到廣泛應(yīng)用，被稱為“分子指紋”的拉曼光譜技術(shù)因其無損、便捷、速度快、穩(wěn)定性高的優(yōu)良特性，在光學(xué)快檢領(lǐng)域受到大力推崇。

但是，在拉曼光譜檢測技術(shù)擁有眾多優(yōu)點(diǎn)的同時，其缺陷也暴露出來，信號弱和易受干擾可以說是目前限制拉曼技術(shù)應(yīng)用的瓶頸。特別是在拉曼光譜應(yīng)用領(lǐng)域不斷擴(kuò)展的現(xiàn)在，越來越多的物質(zhì)或是因?yàn)闂l件限制無法獲取高信噪比的拉曼光譜，或是因?yàn)樽陨韽?qiáng)熒光掩蓋了原本就很弱的拉曼信號，導(dǎo)致應(yīng)用受限。

位移差分拉曼光譜（SERDS），這種技術(shù)基于在兩個有輕微偏移的激發(fā)波長中收集兩張不同的光譜，由于分子所發(fā)射的光（熒光或磷光）只能從某一多重態(tài)中的低態(tài)激發(fā)，因此對于激發(fā)光的微小偏移并不影響背景（樣品受激發(fā)射光譜），同時，噪聲與環(huán)境干擾光也同樣與光源入射波長無關(guān)。而拉曼光譜作為散射光譜特征峰出現(xiàn)的位置與激發(fā)光源頻譜位置有固定關(guān)系，當(dāng)激發(fā)光頻率移動時拉曼特征峰會跟著移動。根據(jù)這一原理，使用兩種波長光源對樣品照射時，獲取的兩張光譜中，受激發(fā)射光譜和噪聲背景分量是一致的，而拉曼光譜部分則會存在與光源波長差對應(yīng)的平移。理想情況下對兩張譜圖進(jìn)行差分處理，所獲得的差分譜中，受激發(fā)射譜和噪聲背景會*抵消，剩下的是拉曼光譜與自身平移光譜的差分圖像。再通過去噪解卷積算法將拉曼光譜還原出來。

但實(shí)際情況中，首先兩個光源無法同時測量，因此需采用分時鍵控的方式，這會導(dǎo)致兩次獲取光譜中的噪聲背景部分必然有差異。其次，物質(zhì)的受激發(fā)射光譜與入射光源能量相關(guān)，而散射光譜能量同樣遵循瑞利定理與入射光波長的四次方成反比，這導(dǎo)致兩張原始光譜中的受激發(fā)射譜和散射譜分量都會有差異。入射光的波長差對差分還原算法至關(guān)重要，便攜式設(shè)備中如何控制光源臺間差并設(shè)計較高容錯性的還原算法也是技術(shù)可產(chǎn)品化的關(guān)鍵。而兩種波長光源的輸出能量差，則在計算差分譜時引入了對齊誤差，也需要通過一系列算法消除。這也是為什么自上世紀(jì)90年代提出差分拉曼方法后，該技術(shù)一直無法形成成熟產(chǎn)品，特別是小型化便攜式產(chǎn)品。

申貝儀器研發(fā)團(tuán)隊(duì)在差分拉曼光譜上有三年以上的深入研究，通過不斷的研究實(shí)驗(yàn)，我們總結(jié)出便攜式差分拉曼光譜儀的主要設(shè)計難點(diǎn)：

◆小體積高可靠性雙頻激光器集成設(shè)計（超高溫控精度要求，超高精度功率控制，超窄線寬）

◆率光路和高分辨率光譜接收系統(tǒng)設(shè)計

◆準(zhǔn)確分時鍵控的脈沖式采樣方式

◆激光光源波長臺間差矯正

◆差分譜圖標(biāo)準(zhǔn)化算法，消除因臺間差引起的差分間距及對齊誤差

◆光譜對齊、曲線矯正、差分解調(diào)等系列算法

申貝儀器開發(fā)團(tuán)隊(duì)通過多年深入研發(fā)位移差分拉曼光譜技術(shù)，取得突破性進(jìn)展，在自主研發(fā)并迭代優(yōu)化了多波長集成化激光光源、光路系統(tǒng)和高分辨率接收系統(tǒng)的基礎(chǔ)上，還采用BP神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)技術(shù)，基于任意函數(shù)可以被一個有三層單元的網(wǎng)絡(luò)以任意精度逼近(Cybenko1988)這一原理，通過迭代優(yōu)解的方式，同時將差分、對齊和基線矯正同時完成。實(shí)驗(yàn)經(jīng)過幾十次迭代（用時0.2s）可以準(zhǔn)確分離差分信號和基線偏差。

在經(jīng)過多年的不斷迭代研發(fā)后，申貝開發(fā)團(tuán)隊(duì)設(shè)計并推出國內(nèi)便攜式差分拉曼產(chǎn)品——SERDS Portable-BASE

SERDS Portable-BASE優(yōu)勢

◆可直接測量高熒光物質(zhì)

◆抗干擾、抗噪聲，大幅提高系統(tǒng)整體的檢測靈敏度和信噪比

◆濾除干擾峰（如環(huán)境光峰、PL峰等），只保留純凈的拉曼峰，便于理論研究

◆整體系統(tǒng)的高靈敏度保證可以測量微弱信號物質(zhì)（如深色物體），捕捉微小信號差異

◆在保證對拉曼峰測量準(zhǔn)確性的前提下，可大幅降低光源功率

◆消除探測器壞點(diǎn)，提高整機(jī)可靠性和光譜容錯糾錯能力

SERDS Portable-BASE性能參數(shù)

◆光源：雙頻輸出（Δλ≤1nm），單頻輸出功率≤450mw，線寬≤0.06nm

◆光譜范圍：180-2800cm-1

◆差分譜對齊算法：簡智DA-AUTO算法，實(shí)現(xiàn)微小波長差下光譜的能量對齊

◆解調(diào)算法：BPD-Smart算法，通過神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行去噪，曲線矯正和反卷積迭代的差分光譜解調(diào)算法

◆矯正算法：針對設(shè)備臺間差，自動代入光源波長差，多次迭代實(shí)現(xiàn)差分譜標(biāo)準(zhǔn)化。