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13283ES032×Hieff NGS® HG Multiplex PCR Master Mix
參考價: 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 13283ES03 產(chǎn)品型號
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):452更新時間:2023-03-15 09:46:15

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產(chǎn)品簡介
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1ML
貨號 13283ES03 應用領域 生物產(chǎn)業(yè)
本產(chǎn)品適用于多重PCR實驗。2×Hieff NGS® HG Multiplex PCR Master Mix以熱啟動多重PCR酶制劑與2×擴增緩沖液為組分配置成預混液。
產(chǎn)品介紹

HB191218

2×Hieff NGS® HG Multiplex PCR Master Mix

2×高GC多重PCR預混液

 

產(chǎn)品信息

 

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號

規(guī)格

2×Hieff NGS® HG Multiplex PCR Master Mix

2×高GC多重PCR預混液

13283ES03

1 mL

13283ES08

5×1 mL

13283ES50

50 mL

13283ES60

250 mL

13283ES76

500 mL

 

產(chǎn)品描述

 

本產(chǎn)品適用于多重PCR實驗。2×Hieff NGS® HG Multiplex PCR Master Mix以熱啟動多重PCR酶制劑與2×擴增緩沖液為組分配置成預混液。本預混液可兼容GC含量在25%-70%左右的多重基因擴增,快速便捷地用于多重PCR反應,具備高均一性、高特異性和高靈敏度的特點。本試劑適用于不同多重PCR需求,可用于凝膠電泳鑒定20對以內(nèi)不同大小片段的多重產(chǎn)物,也可用于進行數(shù)重及以上擴增子的富集。

 

運輸與保存方式

 

冰袋運輸。-20儲存,有效期1年。

 

參考反應體系

 

組分

體積(μL

終濃度

2×Hieff NGS® HG Multiplex PCR Master Mix

15

1×

Primer mix

x

0.1 μM-0.5 μM

模板DNA

1 ng-400 ng

-

無菌超純水

up to 30

-

【注】

1)上表中DNA量和引物濃度均為推薦用量和濃度,可根據(jù)具體實驗情況進行調(diào)整適濃度。

2)參考建議:每條引物的濃度可在0.1 μM-0.5 μM范圍內(nèi)進行調(diào)整。

3)預混液中已經(jīng)包含擴增所需要的酶、dNTP、鹽離子等,無需額外添加。

第—輪擴增程序

循環(huán)步驟

溫度(℃)

時間

循環(huán)數(shù)

預變性

95℃

3 min

1

變性

95℃

20 sec

15-45

退火延伸

60℃

4-10 min

終延伸

72℃

5 min

1

【注】 在PCR儀上設置上表中的反應程序進行多重PCR反應(設置熱蓋溫度至105左右)

退火延伸時間:100重PCR推薦4 min;1000重推薦8-10 min需要自己根據(jù)引物情況摸索。

PCR產(chǎn)物磁珠純化: 建議在30 μL 反應體系中加27μL磁珠(Cat:12601)進行產(chǎn)物純化。

 

第二輪擴增程序

 

循環(huán)步驟

溫度(℃)

時間

循環(huán)數(shù)

預變性

95℃

3 min

1

變性

95℃

20 sec

15-45

退火

60℃

1 min

延伸

72℃

30 sec

 

終延伸

72℃

5 min

1

【注】退火溫度和時間:推薦使用60,也可根據(jù)需要,設立溫度梯度去摸索引物退火的適溫度。推薦退火時間設置為1 min,可以在30 s-1 min內(nèi)調(diào)節(jié)。退火時間太長可能導致擴增產(chǎn)物在膠上呈彌散狀。

PCR產(chǎn)物磁珠純化

建議在30 μL 反應體系中加27μL磁珠(Cat:12601)進行產(chǎn)物純化。



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