細胞IKKβ激酶活性光度法定量檢測試劑是一種旨在通過人工合成多肽底物，在IKKβ激酶敏感性抑制劑存在與否的情況下，受到IKKβ磷酸化后，進而由丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續(xù)循環(huán)法反應系統(tǒng)，測定產(chǎn)生ADP過程中，伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）的氧化反應， 即采用光度法測定其氧化后峰值的變化

本頁描述的產(chǎn)品僅供科學實驗研究使用，不用于臨床，非醫(yī)療器械，不做其他用途。

產(chǎn)品內(nèi)容

清理液（Reagent A）                       最好毫升

裂解液（Reagent B）                      毫升

緩沖液（Reagent C）                      毫升

酶促液（Reagent D）                      微升

反應液（Reagent E）                      微升

底物液（Reagent F）                      微升

陰性液（Reagent G）                      微升

專性液（Reagent H）                      微升

產(chǎn)品說明書                 1份

保存方式

保存清理液（Reagent A）在4℃冰箱里；其余的保存在－20℃冰箱里，嚴格避免光照和反復凍融；有效保證6月

用戶自備

IKKβ激酶：用于抑制劑篩選

1.5毫升離心管：用于樣品保存的容器

15毫升錐形離心管：用于樣品處理的容器

細胞刮脫棒：用于貼壁細胞脫離

（微型）臺式離心機：用于組織預處理

100微升1厘米光徑比色皿或96孔板：用于光度分析操作的容器

分光光度儀或酶標儀：用于樣品光度分析

實驗步驟

一、 待測樣品準備

1． 準備好75cm²細胞培養(yǎng)瓶或100mm細胞培養(yǎng)皿的待測培養(yǎng)細胞（1至5 X 10⁷細胞）

2． 小心加入xx毫升清理液（Reagent A），覆蓋生長表面

3． 小心抽去清理液

4． 使用細胞刮脫棒輕柔刮脫細胞（注意：避免使用胰酶消化）

5． 加入xx毫升清理液（Reagent A），混勻細胞

6． 移入到預冷的15毫升錐形離心管（注意：懸浮細胞從這一步驟開始）

7． 放進4℃臺式離心機離心5分鐘，速度為300g

8． 小心抽去上清液

9． 加入xx微升裂解液（Reagent B），充分混勻

10． 轉(zhuǎn)移到預冷的1.5毫升離心管

11． 強力渦旋震蕩15秒

12． 置于冰槽里孵育30分鐘

13． 放進4℃微型臺式離心機離心5分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）

14． 小心移取500微升上清液到新的預冷的1.5毫升離心管

15． 移取10微升進行蛋白定量檢測（注意：建議使用 Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－HL30030.1）

16． 即刻放進－70℃保存或置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作