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色譜柱堵了怎么辦?搞清楚這幾個原因就不慌了

時間:2022-10-25 閱讀:1063
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色譜柱是液相色譜儀的核心部件,由接頭、螺帽、柱管、填料、墊圈及過濾片等組成。使用一段時間后,經(jīng)常會碰到液相色譜柱堵了的問題,怎么辦呢?

“堵”的表現(xiàn)現(xiàn)象就是柱壓異常升高,直接原因就是流路不暢。堵塞的主要位置就是在色譜柱的前端,主要原因就是流動相里有雜質,雜質的主要來源就是細菌。

原因1:配制流動相時細菌污染

首先我們要認識到,一般的國產(chǎn)甲醇其實不需要額外過濾處理,直接使用沒有問題。即使是有些固態(tài)微粒雜質,也能在液相流路系統(tǒng)最前端的過濾頭上排除,真正容易引起問題的,是水中的細菌。解決它的方法很簡單,就是確保水的可靠性。這里有兩種方式推薦:

(1)使用實驗室專用純水機,既方便又可靠,質量也放心。

(2) 成箱購買市售品牌純凈水,先隨機抽取一支做一下細菌平板實驗,待菌落數(shù)合格方可使用。

 

原因2:使用流動相時的細菌污染

流動相剛開始沒有長菌,在使用時卻產(chǎn)生了細菌污染。這主要是在使用多元液相色譜儀時的一種不良使用習慣造成的。舉個簡單的例子:50%的甲醇水流動相,有兩種使用方式。一種方式是在上機前就配好混合在一起,另一種方式是在流路A放純甲醇,流路B放純水。

從單純實驗效果來說,后一種有明顯的優(yōu)點:首先是簡單,不需要實驗者另個計算配比混合,其次就是比例準確,能得到保留時間重復性較好的實驗效果。

但是,它有一個致命的缺陷,就是純水在流動相瓶中幾天時間就會長細菌(很多情況下不僅僅用純水作流動相,而是用緩沖鹽溶液,本身就是優(yōu)質肥料,細菌長得更迅速),一旦有細菌柱子就壞得很快。

所以,寧可犧牲小小的保留時間的重復性,也不要用純水溶液作為流動相的一組??捎?0%的甲醇水代替純水溶液,這樣可以有效排除長細菌的隱患,既可作流動相,也可沖柱。

 

原因3:不適當操作

常見問題有以下幾種: 

(1)在更換零件時選擇的型號有誤,接口不是很匹配,在擰緊的時候產(chǎn)生變形而使得管路堵塞。

(2)樣品處理液凈化得不干凈,長期會在六通閥和柱之間形成阻塞不暢。

(3)在使用手動六通閥時,有些人可能由于手勁小的原因,轉動的不到位,于是造成流路形成了死堵,壓力快速升高超過警戒值。

(4)在使用金屬管路作出廢液管時,應當注意最好廢液瓶中先放一些水,并把廢液管的出口端放在液面下。如果位于在液相上且實驗使用較高濃度的緩沖鹽溶液,在停機時可能在出口端結晶成塊并造成堵塞。這種情況不常見,但卻的確發(fā)生過。


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