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大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子（CRF）elisa試劑盒手冊
閱讀：686 發(fā)布時間：2022-9-7大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子（CRF）檢測范圍：
10ng/L -340ng/L
大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子（CRF）使用目的：
本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子（CRF）含量。
大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子（CRF）實驗原理：
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子（CRF）水平。用純化的大鼠CRF抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子（CRF），再與HRP標(biāo)記的CRF抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子（CRF）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子（CRF）濃度。
大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子（CRF）標(biāo)本要求 ：
1．標(biāo)本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子（CRF）計算：
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。
與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。
大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子（CRF）注意事項：
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴(yán)格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子（CRF）保存條件及有效期：
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個月