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檢測蛋白用WB實驗還是ELISA實驗好?它們有什么區(qū)別?
閱讀：18590 發(fā)布時間：2021-2-22檢測蛋白的實驗有很多種,WB實驗和ELISA實驗是比較常用的兩種實驗方法,這兩種方法哪一種的實驗結(jié)果更為可靠呢?有些人說ELISA自己包被抗體的話會比較麻煩，WB相比更加科學，容易被雜志接納。但是血清中沒有內(nèi)參可以選擇。是不是ELISA實驗操作要簡單很多，那么又如何來解決這樣的一個問題呢？今天上海恒遠來為您解答這個疑惑。
一、WB和ELISA的敏感性有所區(qū)別。雖然前者用ECL顯色敏感度可達pg級，但不同的樣品來源和抗體的質(zhì)量，不能保證每次都到這個級別;而ELISA可以達到ng級。也就是說ELISA更適于豐度低的蛋白檢測。而且由于ELISA檢測所用的樣品少，也適用于樣品來源有限的蛋白濃度檢測。
二、在定量方面，ELISA一般用于定性，定量也可， WB可以做到半定量。
三、ELISA不如WB的特異性好。
四、關(guān)于血清內(nèi)因子的檢測，如果WB檢得出就不要用ELISA。血清內(nèi)參的問題，在ELISA里也一樣存在。操作來說ELISA當然簡單，但由于兩種方法各有優(yōu)點，不能全面相互代替。
ELISA:
優(yōu)點：靈敏，能夠定量（有標準品的情況下）
缺點：需要購買試劑盒（自己做試劑盒的話建議您放棄），價格昂貴（雙抗夾心法需要兩個抗體，當然貴?。?，而且需要排除假陽性假陰性的問題，需要考慮的問題較多。此外就是發(fā)文章沒有圖片不太好看（呵呵，自己的感覺）
WB：
優(yōu)點：試劑便宜，認同度高，發(fā)文章沒有問題，如果用高靈敏度的發(fā)光試劑盒也可以達到非常高的靈敏度
缺點：操作步驟較多，如果實驗室沒有成熟的條件，想開展起來需要花一些功夫，分子量很大（個人認為>200kD）和很?。?lt;5kD）的目的蛋白比較麻煩。