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HPLC進樣方式有哪幾種
自動進樣器在色譜分析儀器中有著廣泛應(yīng)用，液相色譜系統(tǒng)大多使用自動進樣器引入樣品?，F(xiàn)在的色譜實驗室，大都使用六通進樣閥或自動進樣器。進樣裝置要求：密封性好，死體積小，重復(fù)性好，保證中心進樣，進樣時對色譜系統(tǒng)的壓力、流量影響小。HPLC進樣方式可分為：隔膜進樣、停流進樣、閥進樣、自動進樣。
1、隔膜進樣
用微量注射器將樣品注入專門設(shè)計的與色譜柱相連的進樣頭內(nèi)，可把樣品直接送到柱頭填充床的中心，死體積幾乎等于零，可以獲得的柱效，且價格便宜，操作方便。但不能在高壓下使用(如10MPA以上);此外隔膜容易吸附樣品產(chǎn)生記憶效應(yīng)，使進樣重復(fù)性只能達到1～2%;加之能碉各種溶劑的橡皮不易找到，常規(guī)分析使用受到限制。
2、停流進樣
可避免在高壓下進樣。但在HPLC中由于隔膜的污染，停泵或重新啟動時往往會出現(xiàn)“鬼峰”;另一缺點是保留時間不準(zhǔn)。在以峰的始末信號控制餾分收集的制備色譜中，效果較好。
3、閥進樣
一般HPLC分析常用六通進樣閥(以美國RHEODYNE公司的7725和7725I型常見)，其關(guān)鍵部件由圓形密封墊子(轉(zhuǎn)子)和固定底座(定子)組成。由于閥接頭和連接管死體積在存在，柱效率低于隔膜進樣(約下降5～10%左右)，但耐高壓(35～40MPA)，進樣量準(zhǔn)確，重復(fù)性好(0.5%)，操作方便。
六通閥進樣方式有部分裝液法和*裝液法兩種。①用部分裝液法進樣時，進樣量應(yīng)不大于定量環(huán)體積的50%(多75%)，并要求每次進樣體積準(zhǔn)確、相同。此法進樣的準(zhǔn)確度和重復(fù)性決定于注器取樣的熟練程度，而且易產(chǎn)生由進樣引起的峰展寬。②用*裝液法進樣時，進樣量應(yīng)不小于定量環(huán)體積的 5～10倍9少3倍)，這樣才能*置換定量環(huán)內(nèi)和流動相，消除管壁效應(yīng)，確保進樣的準(zhǔn)確度及重復(fù)性。
六通閥使用和維護注意事項：①樣品溶液進樣前必須用0.45UM濾膜過濾，以減少微粒對進樣閥的磨損。②轉(zhuǎn)動閥芯時不能太慢，更不能停留在中間位置，否則流動相受阻，使泵內(nèi)壓力劇增，甚至超過泵的大壓力;轉(zhuǎn)到進樣位時，過高的壓力將使柱頭損壞。③為防止緩沖鹽和樣呂殘留在進樣閥中，每次分析結(jié)束后應(yīng)沖洗進樣閥。通?？捎盟疀_洗，或先用能溶解樣品的溶劑沖洗，再用水沖洗。
4、自動進樣
用于大量樣品的常規(guī)分析。
液相自動進樣器做為客戶使用來說較關(guān)注的問題是：
1.定量是不是準(zhǔn)確?，F(xiàn)在方法驗證特別多，基本都是外標(biāo)，所以進樣準(zhǔn)確那是必須滴。
2.定位準(zhǔn)確。反復(fù)進樣，一般半年左右是考驗儀器的時候，半年過去了還那么準(zhǔn)確就說明是經(jīng)的住考驗的，還有就是如果瓶子的位置放錯，放重了，或是沒放，自動進樣器應(yīng)該有足夠的應(yīng)對出錯，經(jīng)過調(diào)整后能依然準(zhǔn)確定位。
3.防殘留設(shè)計。無論采用什么技術(shù)，必須小的殘留，這要在洗針設(shè)計上下足功夫。
4.價格。
5.進樣速度。簡捷的進樣，快速洗針也要求越來越高。
6.防光照設(shè)計。
7.易于是清理及擦拭設(shè)計。
8.配套其它部件的設(shè)計及價格。