在選擇色譜柱之前,先多了解自己的樣品和雜質(zhì),他們的類(lèi)型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等。
1.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測(cè),即要選擇承受100%純水且對(duì)極性化合物保留很好的色譜柱
2.如果樣品極性太強(qiáng),或酸性太強(qiáng);可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,HILIC(親水色譜),也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱(缺點(diǎn)是離子對(duì)試劑平衡時(shí)間長(zhǎng),對(duì)流動(dòng)相pH要求比較精密,否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn),另外離子對(duì)試劑很難洗下來(lái),基本上用了離子對(duì)的色譜柱就不能再用于其它實(shí)驗(yàn))
3.若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì),且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過(guò)修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等),他們都會(huì)減少堿性化合物的拖尾,一般會(huì)選擇中性或偏堿的條件下做,因?yàn)檫@樣可增加堿性樣品的保留
4.如果堿性化合物的極性太強(qiáng),或堿性太強(qiáng);可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(cè)(優(yōu)點(diǎn)是方法開(kāi)發(fā)簡(jiǎn)單,缺點(diǎn)是目前實(shí)現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少,價(jià)格也高)或者選用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用,這也是很經(jīng)典的檢測(cè)堿性樣品的方法)選擇強(qiáng)離子交換柱(缺點(diǎn)是不能用來(lái)分析其它樣品,對(duì)流動(dòng)相pH要求比較精密,否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn))也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱
液相色譜柱是用于分離、純化和檢測(cè)混合物中化學(xué)成分的重要工具。其主要特點(diǎn)如下:
分離效果好:液相色譜柱可以分離復(fù)雜的混合物,因?yàn)樗鼈兙哂懈叻直媛屎瓦x擇性。這些特性源自于柱填料的多樣性、柱徑、長(zhǎng)度以及使用的溶劑系統(tǒng)等因素。
操作簡(jiǎn)便:相對(duì)于其他色譜技術(shù),液相色譜柱操作簡(jiǎn)單易學(xué),只需掌握一些基本技能即可使用。此外,它還允許在線監(jiān)測(cè)和數(shù)據(jù)記錄。
處理大樣品量:液相色譜柱可以處理大樣品量,從毫升到升級(jí)別。這使得它在生產(chǎn)環(huán)境中特別有用,可以快速分離和純化大量的產(chǎn)品。
高靈敏度:由于液相色譜柱通常與檢測(cè)器相結(jié)合,因此它可以實(shí)現(xiàn)高靈敏度的定量和定性分析。同時(shí),現(xiàn)代檢測(cè)器的發(fā)展提高了其靈敏度和選擇性。
應(yīng)用廣泛:液相色譜柱在化學(xué)、藥學(xué)、食品科學(xué)、環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域中應(yīng)用廣泛。它們可以用于分離有機(jī)和無(wú)機(jī)化合物、生物大分子以及各種雜質(zhì)。
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