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植物組織果糖（FT）含量檢測試劑盒說明書
微量法
貨號：BC2455
規(guī)格：100T/96S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：
試劑一：10mg 果糖。臨用前加1mL蒸餾水溶解，得到10mg/mL的果糖標準液，2-8℃保存兩周。
產品說明：
果糖是一種最為常見的己酮糖，是葡萄糖的同分異構體，以游離狀態(tài)大量存在于水果的漿汁和蜂蜜中，能與葡萄糖結合生成蔗糖。果糖是最甜的單糖，廣泛應用于食品、醫(yī)藥、保健品生產中。
在酸性條件下果糖與間*二酚反應，生成有色物質，在480nm下有特征吸收峰。


技術指標：
低檢出限：0.065 mg/mL
線性范圍：0.5-35 mg/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
稱取約0.05g樣本，常溫研碎；加入0.5mL提取液，適當研磨后快速轉移到有蓋離心管中；置于80℃水浴鍋中10min（蓋緊，以防止水分散失），振蕩3~5次，冷卻至室溫后，4000g，常溫離心10min，取上清；加入少量（約2mg）試劑四，80℃脫色30min（蓋緊，以防止水分散失）；再加入0.5mL提取液，4000g，常溫離心10min，取上清液測定。
二、測定步驟
1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上，調節(jié)波長至480nm，分光光度計用蒸餾水調零。
2、試劑一的稀釋：取200μL 10mg/mL果糖標準液，加入300μL蒸餾水，充分混勻，配制成4mg/mL標準液使用，現(xiàn)用現(xiàn)配。（實驗中每管需要30μL，為減小實驗誤差，故配制大體積。）

3、樣本測定（在1.5mL EP管中依次加入下列試劑）：

渦旋混勻，置于80℃水浴鍋中準確反應10min（蓋緊，以防止水分散失），冷卻至室溫后取200μL至微量玻璃比色皿或96孔板中測定480nm處光吸收值，記為A空白管、A標準管、A測定管，并計算ΔA測定=A測定管-A空白管、ΔA標準=A標準管-A空白管。標準管和空白管只需測1-2次。

注意事項：
如果樣本吸光值大于1.1，建議將樣本用提取液稀釋后進行測定。計算公式中注意乘以稀釋倍數(shù)。
參考文獻：
[1] Varandas S, Teixeira M J, Marques J C, et al. Glucose and fructose levels on grape skin: interference in Lobesia botrana behaviour[J]. Analytica chimica acta, 2004, 513(1): 351-355.
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