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目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> BC2255-100T/96S3-磷酸甘油酸激酶檢測(cè)試劑盒 微量法

3-磷酸甘油酸激酶檢測(cè)試劑盒 微量法
  • 3-磷酸甘油酸激酶檢測(cè)試劑盒 微量法
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
  • 型號(hào) BC2255-100T/96S
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 產(chǎn)品資料 查看pdf文檔
  • 所在地 北京市
屬性

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更新時(shí)間:2024-04-11 09:12:08瀏覽次數(shù):549評(píng)價(jià)

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CAS 詳詢 純度 詳詢
分子量 詳詢 分子式 詳詢
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100T/96S
貨號(hào) BC2255 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè)
主要用途 測(cè)定意義:3-磷酸甘油酸激酶是糖酵解的關(guān)鍵酶,廣泛存在于動(dòng)植物和微生物體內(nèi),催化
儲(chǔ)存條件
-20℃
3-磷酸甘油酸激酶檢測(cè)試劑盒 微量法
有效期
6個(gè)月
單位

推薦
若使用96孔板測(cè)定,需使用96孔UV板,推薦貨號(hào)YA0602
英文名稱
Phosphoglycerate Kinase(PGK) Activity Assay Kit
別名
3-磷酸甘油酸激酶試劑盒 PGK Kit 3-磷酸甘油酸激酶(PGK)試劑盒 3-磷酸甘油酸激酶(PGK)測(cè)試盒
檢測(cè)方法

3-磷酸甘油酸激酶(PGK)活
性檢測(cè)試劑盒說明書

微量法
貨號(hào):BC2255
規(guī)格:100T/96S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液液體120 mL×1瓶2-8保存
試劑一液體10 mL×1瓶2-8保存
試劑二粉劑×1-20保存
試劑三粉劑×1-20保存
試劑四粉劑×1-20保存
試劑五粉劑×1-20保存

溶液的配制:

  1. 試劑二:臨用前加入2.5 mL蒸餾水充分溶解后待用,用不完的試劑分裝后-20保存,禁止反復(fù)凍融;

  2. 試劑三:臨用前加入1 mL 蒸餾水充分溶解,用不完的試劑分裝后-20保存,禁止反復(fù)凍融

  3. 試劑四:臨用前加入1 mL 蒸餾水充分溶解,用不完的試劑分裝后-20保存,禁止反復(fù)凍融;

  4. 試劑五:粉劑置于試劑瓶?jī)?nèi)棕色管中。臨用前加入4 mL 蒸餾水充分溶解,用不完的試劑分裝后-20保存,禁止反復(fù)凍融;

  5. 工作液的配制:按照蒸餾水:試劑一:試劑二:試劑三:試劑四:試劑五=6:10:2:1:1:4的體積比例充分混勻,現(xiàn)用現(xiàn)配。

產(chǎn)品說明:
3-磷酸甘油酸激酶是糖酵解的關(guān)鍵酶,也是生物得以生存的關(guān)鍵酶。廣泛存在于動(dòng)植物和微生物體內(nèi),具有影響DNA復(fù)制和修補(bǔ)及刺激病毒RNA合成等生物學(xué)功能,廣泛應(yīng)用于藥物靶標(biāo)設(shè)計(jì)。
3-磷酸甘油酸激酶催化3-磷酸甘油酸和ATP產(chǎn)生1,3-二磷酸甘油酸和ADP,1,3-二磷酸甘油酸在3-磷酸甘油醛脫氫酶和NADH作用下產(chǎn)生3-磷酸甘油醛、NAD和磷酸,引起340nm處的吸光度下降,即反映了3-磷酸甘油酸激酶的活性的高低。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、低溫臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、微量石英比色皿/96孔UV板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng):

  1. ΔA大于0.8或者A1測(cè)定小于0.9時(shí)(96UV板是當(dāng)ΔA大于0.5或者A1測(cè)定小于0.6時(shí)),建議將粗酶液用提取液稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。當(dāng)ΔA小于0.01時(shí),可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(10min15min或增加樣本體積來測(cè)定。

  2. 空白管為檢測(cè)各試劑組分質(zhì)量的檢測(cè)孔,正常情況下,變化不超過0.01。

  3. 樣本的蛋白濃度需自行測(cè)定,由于提取液中含有一定濃度的蛋白(約1mg/mL),所以測(cè)定樣本蛋白濃度時(shí)需扣除提取液自身蛋白濃度。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

  1. 0.1g白菜加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨,取上清后再用提取液稀釋4倍,之后按照測(cè)定步驟操作,用微量石英比色皿測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定管=A1測(cè)定-A2測(cè)定=1.05-0.5559=0.4941ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.9966-0.9941=0.0025,ΔA=ΔA測(cè)定管-ΔA空白管=0.4941-0.0025=0.4916,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得PGK(U/g 質(zhì)量)=321.54×ΔA÷W×稀釋倍數(shù)= 321.54×0.4916÷0.1×4=6322.7626 U/g 質(zhì)量。

  2. 取0.1g小鼠肌肉加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨,取上清后再用提取液稀釋20,之后按照測(cè)定步驟操作,用微量石英比色皿測(cè)得計(jì)算,ΔA測(cè)定管=A1測(cè)定-A2測(cè)定=0.9327-0.4518=0.4809,ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.9966-0.9941=0.0025,ΔA=ΔA測(cè)定管-ΔA空白管=0.4809-0.0025=0.4784,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得PGK(U/g 質(zhì)量)=321.54×ΔA÷W×稀釋倍數(shù)= 321.54×0.4784÷0.1×20=30764.9472 U/g 質(zhì)量。

  3. 取駱駝血清樣本100μL按照測(cè)定步驟直接測(cè)定,用微量石英比色皿測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定管=A1測(cè)定-A2測(cè)定= 1.0435-0.9793=0.0642,ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.9966-0.9941=0.0025,ΔA=ΔA測(cè)定管-ΔA空白管=0.0642-0.0025=0.0617,按液體體積計(jì)算酶活得:PGK(U/mL=321.54×ΔA=321.54×0.0617=19.8390 U/mL。

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BC2270/BC2275 果糖-1,6-二磷酸醛縮酶(FBA)活性檢測(cè)試劑盒
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3-磷酸甘油酸激酶檢測(cè)試劑盒 微量法 3-磷酸甘油酸激酶檢測(cè)試劑盒 微量法

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