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血液中的酸性藥物固相萃取凈化方法
閱讀：3198 發(fā)布時(shí)間：2010-5-27
血液中的酸性藥物固相萃取凈化方法
1. 樣品制備
100μL 人體血液中加入300μL 1%甲酸水溶液。
2. SPE凈化
a. 活化：分別用500μL甲醇，500μL水預(yù)淋洗SPE柱；
b. 淋洗：用500μL5%甲醇水溶液淋洗柱床；
c. 洗脫：加入500μL甲醇溶液洗脫，收集洗脫液。
3. 樣品后處理
將收集的洗脫液蒸發(fā)至干，以100μL的80:20的5mmol/L甲酸銨:甲醇溶液溶解。
4. LC-MS/MS檢測
使用Varian 1200LC-MS-MS分析檢測，ESI方式，干燥氣溫度250?C，25psi，負(fù)離子模式
色譜柱：Pursuit C18 3μm 50×2.0mm（PN. A6001050X020）
柱流速：0.2mL/min
流動相：
A ：5mmol/L甲酸銨
B ：甲醇
LC梯度洗脫程序: 時(shí)間/min %B
0.00 40
0.15 40
1.00 80
3.00 80
4.30 40
5. 樣品成分
阿托他汀，扶他林，呋塞米，普伐他汀
1. 樣品制備
100μL 人體血液中加入300μL 1%甲酸水溶液。
2. SPE凈化
a. 活化：分別用500μL甲醇，500μL水預(yù)淋洗SPE柱；
b. 淋洗：用500μL5%甲醇水溶液淋洗柱床；
c. 洗脫：加入500μL甲醇溶液洗脫，收集洗脫液。
3. 樣品后處理
將收集的洗脫液蒸發(fā)至干，以100μL的80:20的5mmol/L甲酸銨:甲醇溶液溶解。
4. LC-MS/MS檢測
使用Varian 1200LC-MS-MS分析檢測，ESI方式，干燥氣溫度250?C，25psi，負(fù)離子模式
色譜柱：Pursuit C18 3μm 50×2.0mm（PN. A6001050X020）
柱流速：0.2mL/min
流動相：
A ：5mmol/L甲酸銨
B ：甲醇
LC梯度洗脫程序: 時(shí)間/min %B
0.00 40
0.15 40
1.00 80
3.00 80
4.30 40
5. 樣品成分
阿托他汀，扶他林，呋塞米，普伐他汀
本方法中使用的SPE柱：
Bond Elut Plexa10mg 96孔板（PN. A4969010）。
Bond Elut Plexa10mg 96孔板（PN. A4969010）。