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小鼠前列腺素 E2（PGE2）酶聯(lián)免疫分析（ELISA）
試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
藥品名稱：
通用名：小鼠前列腺素 E2（PGE2）酶聯(lián)免疫分析試劑盒
使用目的：
本試劑盒用于測定小鼠血清，血漿及相關(guān)液體樣本中前列腺素 E2（PGE2）含量。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用酶聯(lián)免疫競爭法測定標(biāo)本中小鼠前列腺素 E2（PGE2）水平。用純化的小鼠
前列腺素 E2（PGE2）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中加入前列腺素
E2（PGE2），和HRP 標(biāo)記的羊抗鼠抗原，使它們競爭結(jié)合，，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯
色。樣本顏色的深淺和樣品中的前列腺素 E2（PGE2）的含量呈負相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波
長下測定吸光度（OD 值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中小鼠前列腺素 E2（PGE2）的含量。
試劑盒組成
1 20 倍濃縮洗滌液30ml×1 瓶7 終止液6ml×1 瓶
2 酶標(biāo)試劑6ml×1 瓶8 標(biāo)準(zhǔn)品（450ng/L） 0.5ml×1 瓶
3 酶標(biāo)包被板12 孔×8 條9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液6ml×1 瓶10 說明書1 份
5 顯色劑A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 張
6 顯色劑B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 個
標(biāo)本要求
1．標(biāo)本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10 孔，在*、第二孔中分別加標(biāo)
準(zhǔn)品100μl，然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二
孔中各取100μl 分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，
混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 棄掉，再各取50μl 分別加到第五、第六孔
中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各
取50μl 分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混
勻后從第七、第八孔中分別取50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)
品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl 棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，
濃度分別為300ng/L，200ng/L ，100ng/L，50ng/L， 25ng/L）。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣
品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣
品zui終稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，輕輕晃動混勻。
3. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
4. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60 分鐘。