諾博萊德 酵母組蛋白提取試劑盒

NobleRyder P4954 酵母組蛋白提取試劑盒

產(chǎn)品貨號(hào)：P4954

產(chǎn)品名稱：酵母組蛋白提取試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：50T/100T

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

中文名稱：酵母組蛋白提取試劑盒

規(guī)格：100T ; 50T

儲(chǔ)存條件：2-8℃，1 year

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder P4954 酵母組蛋白提取試劑盒

酵母組蛋白提取試劑盒適用于從各種昆蟲組織樣本中提取組蛋白。提取過(guò)程簡(jiǎn)單方便，避免了重復(fù)性差的研磨法，超聲波法或壓榨法對(duì)酵母細(xì)胞的破壞，避免激烈的機(jī)械處理造成的氧化和熱度升高對(duì)目的蛋白的破壞作用。提取的蛋白可用于WesternBlotting、蛋白質(zhì)電泳、組蛋白修飾實(shí)驗(yàn)比如乙酰化、甲基化、sumoylation等下游蛋白研究。

適用樣本：酵母

使用前請(qǐng)注意：

1. 蛋白酶抑制劑未開(kāi)蓋使用前也可以 2-8℃儲(chǔ)存。開(kāi)蓋使用后-20℃儲(chǔ)存。

2. 蛋白酶抑制劑在 2-8℃低溫時(shí)是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴，

變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。

3. 試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完！

產(chǎn)品介紹：

酵母組蛋白提取試劑盒適用于從各種昆蟲組織樣本中提取組蛋白。提取過(guò)程簡(jiǎn)單方便，避免了重復(fù)性差的研磨法，超聲波法或壓榨法對(duì)酵母細(xì)胞的破壞，避免激烈的機(jī)械處理造成的氧化和熱度升高對(duì)目的蛋白的破壞作用。提取的蛋白可用于 Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳、組蛋白修飾實(shí)驗(yàn)比如乙?；?、甲基化、sumoylation 等下游蛋白研究。

自備試劑和儀器：

離心機(jī)、振蕩器、勻漿機(jī)/勻漿器、渦旋混勻器、移液器、冰箱、冰盒，PBS 緩沖液、蛋白定量試劑盒，離心管、吸頭、一次性手套。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1. 使用方便，從細(xì)胞，組織中提取蛋白不需經(jīng)過(guò)研磨、反復(fù)凍融、超聲破碎等前處理。

2. 提取過(guò)程簡(jiǎn)單方便。

3. 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。

4. 紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí)，背景干擾低。

5. 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含 6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑，每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括si氨酸蛋白酶、半guang氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

操作步驟：

一、使用注意事項(xiàng)

1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，取得最佳實(shí)驗(yàn)效果

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。

3. 過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。

4. 蛋白酶抑制劑儲(chǔ)存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。

5. 如果試劑盒不能短時(shí)間內(nèi)用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。

6. 可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。

7. 下游實(shí)驗(yàn)如果是進(jìn)行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性檢測(cè)，提取液可以不加蛋白酶抑制劑或磷酸酶抑制劑，注意提取過(guò)程保持低溫操作，縮短離心時(shí)間。

8. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

9. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

二、酵母組蛋白提取

1. 提取液制備：

每 500μL 蛋白提取液 A 中加入 2μL 蛋白酶抑制劑混合物混勻后置冰上備用。

2. 收集酵母培養(yǎng)物，在 4℃，1000×g 條件下離心 5-10min，吸干上清，收集酵母細(xì)胞。

3. 用冷 PBS 洗滌酵母細(xì)胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。

4. 每 100-200mg 濕重酵母細(xì)胞（或者 100-200μL 酵母沉淀體積）中加入 250-500ul 冷的酵母蛋白提取液 E，充分混勻。

5. 在室溫或 37℃條件下于振蕩 30min-2h。

6. 在 4℃，2000×g 條件下離心 5-10min，棄上清，留沉淀。

7. 在沉淀中加入 500μL 蛋白提取液 A，混勻后，在 4℃條件下輕輕振蕩 20-40min。

8. 在 4℃，16000×g 條件下離心 15min，棄上清，留沉淀。

9. 沉淀中加入 100μL 組蛋白提取液 B。

10. 用 200μL 槍頭反復(fù)吹打混勻或充分渦旋振蕩混勻。

11. 置 4℃冰箱過(guò)夜存放。

12. 在 12000×g 條件下離心 10min，收集上清。

13. 在上清中加入 10-25μL 試劑 C 充分混勻。

14. 加入上樣緩沖液混勻后煮沸，分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。

注意事項(xiàng)：

1. 本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹di清除殘留清潔劑。

3. 實(shí)驗(yàn)完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

4. 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

5. 如果試劑不小心接觸皮膚或眼睛，應(yīng)立即用水沖洗。

 酵母組蛋白提取試劑盒

產(chǎn)品訂購(gòu)信息：

P4954  酵母組蛋白提取試劑盒  50T/100T