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細胞鈣離子檢測實驗

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鈣離子檢測

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伊萊博生物科技(上海)有限公司,公司總部位于上海長江軟件園。2024年1月與上海大學醫(yī)學院成立聯(lián)合研究中心,主要以生命科學研究為基礎,專注于研究成果轉化及技術服務創(chuàng)新,建立了包含腫瘤生物學、病理學、免疫學、細胞生物學、生物化學與分子生物學以及動物實驗等學科的研究服務體系,為醫(yī)學領域的發(fā)展做出了重要貢獻。


目前已建成并投入使用的實驗室面積近2800平方米,包含基礎實驗平臺、組學實驗平臺以及動物實驗平臺,基本能夠滿足科研課題研究的全流程。


伊萊博生物擁有專業(yè)的技術支持和實驗操作人員團隊,核心成員來自中科院、復旦、交大、同濟等國內重點高校及科研機構,能夠提供前沿的、完善的實驗技術咨詢與服務。


為了響應國家大力發(fā)展基礎研究的號召,推動實驗科學領域的進步,伊萊博生物充分利用積累多年的科研資源優(yōu)勢,為廣大科研工作者提供實驗技術培訓服務,從理論和實操兩個部分,培養(yǎng)其科研思維以及解決問題的能力,為今后的科研工作奠定堅實的基礎。








免疫學;ELISA試劑盒,抗體,生化試劑,相關試劑。原代細胞,傳代細胞,及培養(yǎng)試劑

應用領域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè)

細胞鈣離子檢測實驗原理

Fluo-3廣泛用于長波長的熒光鈣指示劑。其在506 nm處被吸收,可以被氬離子激光的488 nm激發(fā)光激發(fā),便于檢測。Fluo-3在沒有 同鈣結合的情況下,無熒光產生。但是,在與鈣結合后,熒光( 526 nm )增強至少40倍。Fluo-3/AM是一 種可以穿透細胞膜的熒光染料。 Fluo-3/AM的熒光非常弱 ,其熒光不會隨鈣離子濃度升高而增強。Fluo-3/AM進 入細胞后可以被細胞內的酯酶剪切形成Fluo-3 ,從而被滯留在細胞內。Fluo-3可以和鈣離子結合,結合鈣離子后可以產生較強的熒光,大激發(fā)波長為506 nm ,大發(fā)射波長為526nm。實際檢測時*使用的激發(fā)波長為488 nm左右,發(fā)射波長為525-530 nm。
細胞鈣離子檢測實驗步驟
1)用激光共聚焦培養(yǎng)皿培養(yǎng)細胞。去除培養(yǎng)基后,用PBS洗滌細胞,然后加入適量含有fluo-3/AM的PBS緩沖液( fluo-3/AM終濃度為0.5-5μM ),置于37°C避光孵育 30分鐘。探針濃度和負載時間需要根據(jù)細胞類型進行調整,可查閱文獻。
2)用PBS溶液輕洗2次,再加入PBS緩沖液,繼續(xù)孵育20 min , 37°C ,確保fluo-3/AM在胞內*水解成fuo-3。
3)用LCSM采集熒光信號, 激發(fā)波長488 nm ,發(fā)射波長525 nm。
注意:此處理方法適用于貼壁細胞。如果是懸浮細胞或半懸浮細胞,可低速離心收集細胞后,進行處理,
然后取細胞懸液滴在共聚焦蓋玻片上直接觀察。





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