gibco澳洲胎牛血清貨號(hào):10099-133 現(xiàn)貨
- 公司名稱 上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2023/5/7 14:50:44
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
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Gibco胎牛血清價(jià)格,物美價(jià)廉,量大從優(yōu),部分gibco胎牛血清*銷售。
gibco澳洲胎牛血清貨號(hào):10099-133 現(xiàn)貨
上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司主營(yíng)品牌:BI品牌,Gibco品牌, Bovogen品牌,hyclone品牌,ATCC品牌,Sigma品牌,abcam品牌,CST品牌,PAA品牌,PAN品牌。
主營(yíng):進(jìn)口胎牛血清,gibco10099-141胎牛血清,gibco10091-148胎牛血清,gibco10270-106胎牛血清,小牛血清,胰酶,雙抗,細(xì)胞系,代購(gòu)ATCC原代細(xì)胞,sigma人AB血清。(需要提供海關(guān)報(bào)關(guān)單等相關(guān)事宜,請(qǐng)咨詢本公司)
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Gibco胎牛血清使用方法
在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,經(jīng)常加入5%-20%的Gibco胎牛血清,較常使用的Gibco胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細(xì)胞的基因表達(dá)譜,影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中使用10%的Gibco澳洲胎牛血清培養(yǎng)293T細(xì)胞,效果非常好。但是有些細(xì)胞也會(huì)使用5%的Gibco胎牛血清或者20%的Gibco胎牛血清,要根據(jù)具體細(xì)胞選擇合適的Gibco胎牛血清濃度。
Gibco胎牛血清保存方法
1、需要長(zhǎng)期保存的Gibco牛血清,例如Gibco南美胎牛血清,必須儲(chǔ)存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過(guò)1個(gè)月。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中的有效成分會(huì)被破壞,而影響血清質(zhì)量。如果一次無(wú)法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無(wú)菌50ml離心管中。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽选?/span>
2、一般廠商提供的血清為無(wú)菌,無(wú)需再過(guò)濾除菌。如發(fā)現(xiàn)Gibco牛血清有懸浮物,例如Gibco北美胎牛血清中發(fā)現(xiàn)有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過(guò)濾,切勿直接過(guò)濾血清。
3、瓶裝Gibco胎牛血清南美解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝,一般以50ml無(wú)菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。.切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。
4、熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已*解凍的血清.加熱過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因?yàn)闊崽幚頃?huì)造成血清沉淀物顯著增多,而且還會(huì)影響血清的質(zhì)量.補(bǔ)體參與反應(yīng)有:細(xì)胞毒作用, 平滑肌細(xì)胞收縮, 肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺, 增強(qiáng)吞噬作用, 促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化。
5、血清中的沉淀物和絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會(huì)影響血清本身的質(zhì)量.可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理。 顯微鏡下"小黑點(diǎn)":經(jīng)過(guò)熱處理過(guò)的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點(diǎn)",常誤認(rèn)為血清受污染。一般情況下,此小黑點(diǎn)不會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),但如果懷疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,更換另一批號(hào)的血清。
gibco澳洲胎牛血清貨號(hào):10099-133 現(xiàn)貨
Gibco胎牛血清使用中遇到的常見(jiàn)問(wèn)題總結(jié)
一、血清滅活問(wèn)題。
1、問(wèn):加到培養(yǎng)基中的血清必須滅活嗎?
答:不是必須的,看做什么實(shí)驗(yàn)了,我在使用Gibco南美血清10270106的時(shí)候,都不滅活。
2、問(wèn):Gibco胎牛血清新西蘭(Gibco新西蘭血清10091148)滅活是56℃ 30分鐘嗎?
答:如果用于培養(yǎng)大多數(shù)的腫瘤細(xì)胞,血清一般是不需要滅活的,例如經(jīng)常使用Gibco新西蘭胎牛血清,是不用熱滅活的,這樣可以有效保存血清中的生長(zhǎng)因子。但是如果用于培養(yǎng)一些表面具有補(bǔ)體受體的細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞,血清是需要滅活,一般是56℃,30min。
3、問(wèn):我要做滋養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng),Gibco北美胎牛血清要滅活嗎?
答:一般的細(xì)胞培養(yǎng)中使用到的Gibco胎牛血清,例如Gibco ES胎牛血清是不用滅活的。如果一定需要滅活,可以直接購(gòu)買Gibco胎牛血清澳洲熱版本,進(jìn)口Gibco澳洲胎牛血清熱滅活的一般都已滅活。滅活的Gibco血清價(jià)格一般比未滅活的Gibco血清價(jià)格要高很多。
4、問(wèn):我用病毒上清轉(zhuǎn)染細(xì)胞,培養(yǎng)用的血清需要滅活嗎?因?yàn)檠逯锌赡苡行┭a(bǔ)體和抗體,是不是會(huì)影響轉(zhuǎn)染?我想未滅活的血清中含些抗體補(bǔ)體可能會(huì)和病毒相結(jié)合,影響轉(zhuǎn)染,正確嗎?細(xì)胞是單核細(xì)胞白血病細(xì)胞,病毒是病毒包裝細(xì)胞PT67收集的病毒上清。為什么要用無(wú)血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時(shí),目的是什么?
答:血清一定要滅活,可以先用無(wú)血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時(shí)以后再加血清。避免雜蛋白對(duì)病毒和宿主結(jié)合過(guò)程的干擾,一般是2-6小時(shí),根據(jù)細(xì)胞的狀態(tài)決定。血清不一定需要滅活,滅活的目的是將血清中的補(bǔ)體滅活!這要根據(jù)實(shí)際情況而定,如果沒(méi)有把握那就滅活吧,也不麻煩56度半個(gè)小時(shí)。
5、問(wèn):(1)我買的是Gibco胎牛血清北美,要滅活嗎?有些說(shuō)法是需要,有些說(shuō)直接解凍后就可以加入到培養(yǎng)基中;我配制胰蛋白酶液,用的是D-PBS,有關(guān)系嗎?
答:關(guān)于血清的熱滅活,是很多人感興趣也存在一定爭(zhēng)議的話題。大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室將血清的熱滅活還是作為常規(guī)來(lái)執(zhí)行,因?yàn)橛袃蓚€(gè)作用,*是滅活補(bǔ)體,第二是滅活血清中可能存在的支原體。但是實(shí)驗(yàn)者并沒(méi)有考慮熱處理對(duì)血清中的生長(zhǎng)因子、氨基酸等成分帶來(lái)的負(fù)面影響。
我在實(shí)驗(yàn)室處理Gibco胎牛血清新西蘭的時(shí)候,有一次水浴箱在滅活過(guò)程中出現(xiàn)故障,溫度升高到80℃,血清變成了凝膠狀,我重新處理了另外一份Gibco胎牛血清南美,將兩份血清對(duì)比,發(fā)現(xiàn)高溫直接影響到血清所含的抗體蛋白。在56℃下滅活半小時(shí)以上,肯定也會(huì)對(duì)里面的蛋白起到破壞作用。下次有機(jī)會(huì)我做個(gè)延長(zhǎng)滅活時(shí)間的實(shí)驗(yàn)試試,看看到底有多大的影響。熱滅活之后,血清放在四度冰箱久了,就會(huì)有沉淀產(chǎn)生,這常常會(huì)被認(rèn)為是微生物污染或者是黑膠蟲(chóng)污染。為了驗(yàn)證到底有沒(méi)有污染,常常又會(huì)把血清放置37℃溫育,但是血清中的蛋白會(huì)進(jìn)一步析出,后還是要做鏡檢,無(wú)菌培養(yǎng)試驗(yàn),和革蘭氏染色試驗(yàn),非常麻煩。
我看過(guò)一份資料,里面提到70%的實(shí)驗(yàn)者認(rèn)為滅活是理所當(dāng)然的。常規(guī)滅活建議的溫度在45℃到62℃之間,而時(shí)間則從15分鐘到60分鐘不等。其中較常用的手法是56℃熱處理30分鐘。隨著血清采集、處理、加工工藝的提高,許多早先認(rèn)為是熱滅活的原因已經(jīng)不再成立,只有少數(shù)對(duì)血清進(jìn)行熱滅活的研究者在實(shí)驗(yàn)中證實(shí)了這一步驟的有效性和必要性。有人比較過(guò)11個(gè)不同細(xì)胞株,發(fā)現(xiàn)其中熱滅活對(duì)6 個(gè)細(xì)胞株(HBAE,MDBK,Vero,成纖維細(xì)胞,MRC-5)的生長(zhǎng)帶來(lái)負(fù)面影響,三個(gè)細(xì)胞株(FOX-NY,MDCK和CHO-K1)不受熱滅活的影響,而只有兩個(gè)細(xì)胞株(Balb/3T3,Sp2/0Ag14 hybrid),在熱滅活之后,細(xì)胞生長(zhǎng)有輕微的改善。所以,在正常的操作下,熱滅活通常對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)沒(méi)有明顯的促進(jìn)作用。
你可以摸索一下,Gibco北美血清16000044從-20℃冰箱拿出來(lái)之后在常溫解凍,然后混勻分裝成兩份,一份滅活,一份不滅活,比較這兩種Gibco北美血清對(duì)細(xì)胞是否有影響。然后再確定是滅活還是不滅活。這個(gè)過(guò)程多也就一個(gè)星期。同時(shí)你還要考慮血清滅活與否對(duì)你后續(xù)的實(shí)驗(yàn)有沒(méi)有影響。
問(wèn):(2)分裝后的Gibco澳洲血清10099141血清從-20℃取出放4℃讓其液化,卻見(jiàn)Gibco澳洲血清10099141血清比較混濁,有沉淀產(chǎn)生,這屬正常嗎?
答:正常。
上海琛藝實(shí)業(yè)常備*gibco胎牛血清;以及bi胎牛血清:GIBCO 10099-141;GIBCO16000-044;GIBCO10091-148;gibco10270-106等,Hyclone胎牛血清 HycloneSV30087.01.;Hyclone SV30087.02;HycloneSH30068.03;
HycloneSH30406.01等。。。