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PCR基因擴增儀現(xiàn)象是細胞發(fā)育到特定階段的需要，是細胞在給定時間內(nèi)大量擴增基因序列、產(chǎn)生大量轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的一種有效手段。在卵母細胞的成熟過程中，擴增出大量的基因序列，用于基因轉(zhuǎn)錄，貯備大量的RNA轉(zhuǎn)錄本供受精后的早期使用，對于受精卵早期的蛋白質(zhì)合成及其生命活動的正常執(zhí)行以及隨后的細胞分化和胚胎發(fā)育均具有極其重要的生物學意義。但擴增出的大量基因序列僅在當代作為膜板進行轉(zhuǎn)錄用，不傳遞到下一代細胞。
PCR基因擴增儀技術(shù)（PCR）聚合酶鏈反應又稱無細胞分子克隆系統(tǒng)或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴增法，是基因擴增技術(shù)的一次重大革新。可將極微量的靶DNA特異地擴增上百萬倍，從而大大提高對DNA分子的分析和檢測能力，能檢測單分子DNA或?qū)γ?0萬個細胞中僅含1個靶DNA分子的樣品，因而此方法立即在分子生物學、微生物學、醫(yī)學及遺傳學等多領域廣泛應用和迅速發(fā)展。由于PCR具有敏感性高、特異性強、快速、簡便等優(yōu)點，已在病原微生物學領域中顯示出巨大的應用價值和廣闊的發(fā)展前景。
實驗室工作導則
臨床PCR基因擴增儀檢驗實驗室的設計
?。ㄒ唬┡R床基因擴增檢驗實驗室區(qū)域設計原則。原則上臨床基因擴增檢驗實驗室應當設臵以下區(qū)域：試劑儲存和準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)。這4個區(qū)域在物理空間上必須是*相互獨立的，各區(qū)域無論是在空間上還是在使用中，應當始終處于*的分隔狀態(tài)，不能有空氣的直接相通。根據(jù)使用儀器的功能，區(qū)域可適當合并。例如使用實時熒光PCR儀，擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)可合并；采用樣本處理、核酸提取及擴增檢測為一體的自動化分析儀，則標本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)可合并。各區(qū)的功能是：
1.試劑儲存和準備區(qū)：貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴增反應混合液的準備，以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準備。
2.標本制備區(qū)：核酸（RNA、DNA）提取、貯存及其加入至擴增反應管。對于涉及臨床樣本的操作，應符合生物安全二級實驗室防護設備、個人防護和操作規(guī)范的要求。
3.擴增區(qū)：cDNA合成、DNA擴增及檢測。
4.擴增產(chǎn)物分析區(qū)：擴增片段的進一步分析測定，如雜交、酶切電泳、變性液相分析、測序等。
?。ǘ┡R床PCR基因擴增儀檢驗實驗室的空氣流向。臨床基因擴增檢驗實驗室的空氣流向可按照試劑儲存和準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)進行，防止擴增產(chǎn)物順空氣氣流進入擴增前的區(qū)域?？砂凑諒脑噭﹥Υ婧蜏蕚鋮^(qū)→標本制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)方向空氣壓力遞減的方式進行?？赏ㄟ^安裝排風扇、負壓排風裝臵或其他可行的方式實現(xiàn)。
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